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BTX ECM 399电穿孔仪
适用于动植物、细菌、酵母、哺乳动物、人类细胞(包括活体细胞)的转基因等操作,操作方法可参照相关文献,及向厂商索要。ECM399转基因仪主要用于哺乳动物转染、细菌酶转化,具有脉冲长、磁场强为其特点。
BTX ECM 399电穿孔仪应用举例
高压型用于:DNA或诱变等大肠杆菌结构转基因
低压型用于转染、淋巴、髓胶质成纤维和COS-7细胞
无论任何一种哺乳动物细胞均可选择不同的电压和脉冲范围,并且脉冲可随时调整
细菌/酵母转化(系统:ECM399/630)
电穿孔现在被认作是转化细菌及酵母的最有效的方法。革兰氏阴性细菌(例如大肠杆菌)一般比革兰氏阳性细菌更容易转化,因为他们的细胞壁组成不同。对于革兰氏阴性细菌常常可以获得10的10次方转化2/微克DNA的转化效率,而对于革兰氏阳性细菌,一般可以得到10的6次方转化2/微克DNA。Chang等人(1997)成功对一个mtz-敏感的Heliobacterpylori菌株进行电穿孔以传递mtz抵抗性。Planelles等人(1999)使用电穿孔转化大肠杆菌,以避免使用包装物质。最近电穿孔仪器方面的进展将使研究人员能够进一步优化细菌转化(例如脉冲长度产生方面扩展的功能条件)。
RNA、DNA、蛋白质以及小分子都已经通过电穿孔的方法转入酵母。没有必要在电穿孔前部分去除酵母细胞壁,因为在完整酵母电穿孔方面的进展可以产生高的转化率。Faber等人(1994)年优化了S.Cerevisiae的实验方案,使用HansenulaPolymorpha获得了比以前的报告增加300倍的转化效率。
在质粒修复中,质粒从酵母转入大肠杆菌以进行详细的DNA序列分析,这是另外一种重要的技术。这种两个步骤的过程被电穿孔进行了简化,用于验证隐性基因的结构,将其导入酵母,看基因性和表现性之间的关系。已经建立了标准的实验方案使用指数衰减波发生器例如BTXECM630转化细菌/酵母。使用方形波电穿孔仪的实验方案,例如BTXECM830,来转化细菌/酵母。研究人员还成功将大的质粒(BAC及YAC)导入细菌。电穿孔杯是细胞及酵母电穿孔的最常用附件,而Model747共轴电极使用则变得越来越普遍。
BTX ECM 399电穿孔仪技术参数
高压模式 | 电压 | 10-2500V,10V调进 |
电阻 | 150Ω | |
电容 | 36μF | |
低压模式 | 电压 | 2-500V,2V调进 |
电阻 | 151Ω | |
电容 | 1050μF |
BTX 电穿孔仪ECM 399的工作原理介绍
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