冻干机,冷冻干燥机

微生物菌种冻干机：厌氧菌冷冻干燥管的制备

微生物菌种冻干机：厌氧菌冷冻干燥管的制备 真空冻干机是在抽真空的状态下让物质在低温下干燥的设备，主要用于微生物制剂和生物活性物质的干燥。菌种保藏室用来对微生物进行真空冻干保藏。微生物冷冻干燥法是长期保藏菌种的较好方法之一。因其便于批量生产、长期保藏成活力高，保藏和运输设备简单而成为一种普遍使用的保藏方法，已广泛应用于保存大部分细菌、真菌和一些病毒。 1.安瓿管准备 安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安瓿管时，先用2%盐酸浸泡过夜，自来水冲洗干净后，用蒸馏水浸泡至pH中性，干燥后、贴上标签，标上菌号及时间，加入脱脂棉塞后，121℃下高压灭菌15-20分钟，备用。 2.保护剂的选择和准备 保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时，应注意其浓度及pH值，以及灭菌方法。如血清，可用过滤灭菌；牛奶要先脱脂，用离心方法去除上层油脂，一般在100℃间歇煮沸2-3次，每次10-30分钟，备用。 3.冻干样品的准备 在最适宜的培养条件下将细胞培养至静止期或成熟期，进行纯度检查后（参见科技部自然科技资源平台联合管理办公室文件《微生物菌种纯度检测技术规程》（试行）），与保护剂混合均匀，分装。微生物培养物浓度以细胞或孢子不少于108-1010个/ml为宜（以大肠杆菌为例，为了取得每毫升1010个活细胞菌液2毫升-2.5毫升，只需10毫升琼脂斜面两支）。采用较长的毛细滴管，直接滴入安瓿管底部，注意不要溅污上部管壁，每管分装量约0.1-0.2毫升，若是球形安瓿管，装量为半个球部。若是液体培养的微生物，应离心去除培养基，然后将培养物与保护剂混匀，再分装于安瓿管中。分装安瓿管时间尽量要短，最好在1-2小时内分装完毕并预冻。分装时应注意在无菌条件下操作。 4.预冻 一般预冻2小时以上，温度达到-20℃到-35℃左右。 5.冷冻干燥 采用冷冻干燥机进行冷冻干燥。 将冷冻后的样品安瓿管置于冷冻干燥机的干燥箱内，开始冷冻干燥，时间一般为8-20小时。 终止干燥时间应根据下列情况判断： —— 安瓿管内冻干物呈酥块状或松散片状 —— 真空度接近空载时的最高值 —— 样品温度与管外温度接近 —— 选用1-2支对照管，其水份与菌悬液同量，视为干燥完结 —— 选用一个安瓿管，装1-2%氯化钴，如变深兰色，可视为干燥完结 冷冻干燥完毕后，取出样品安瓿管置于干燥器内，备用。 6.真空封口及真空检验 将安瓿管颈部用强火焰拉细，然后采用真空泵抽真空，在真空条件下将安瓿管颈部加热熔封。 熔封后的干燥管可采用高频电火花真空测定仪测定真空度。 7.保藏 安瓿管应低温避光保藏。 8.质量检查 冷冻干燥后抽取若干支安瓿管进行各项指标检查，如存活率、生产能力、形态变异、杂菌污染等。 9.冷冻干燥法适用范围 适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、霉菌和酵母等的保藏，但不适于霉菌的菌丝型、菇类、藻类和原虫等。 10.保藏周期 不同微生物复苏周期不同，一般10年左右。 11.复苏方法 —— 先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部， —— 将安瓿管顶部烧热， —— 用无菌棉签沾冷水，在顶部擦一圈，顶部出现裂纹，用挫刀或镊子颈部轻叩一下，敲下已开裂的安瓿管的顶端， —— 用无菌水或培养液溶解菌块，使用无菌吸管移入新鲜培养基上，进行适温培养。

冻干机选型之温度和真空度的要求

冻干机选型之温度和真空度的要求 真空冷冻干燥技术在生物工程、医药工业、食品工业、材料科学和农副产品深加工等领域有着广泛的应用。药品冷冻干燥包括西药和中药两部分。西药冷冻干燥在国内已经得到了一定的发展，很多较大型的制药厂都有冷冻干燥设备。在针剂方面，冷冻干燥工艺采用的比较多，提高了药品质量和贮存期限，给医患双方都带来了利益。但目前冻干药品的品种不多，产品价格高，干燥工艺不先进。在中药方面，目前还只局限在人参、鹿茸、山药、冬虫夏草等少量中药材的冻干，大量的中成药还没有采用冻干工艺，与国外差距较大。日本几年前就开展了“汉药西制”，改变了中药的熬制方法，解决了中药不能制成针剂或片剂的传统，也解决了中药不治急病的难题，因此我国中药冻干工艺及产品的研究很有潜力可挖。 在生物技术产品领域，冻干技术主要用于血清、血浆、疫苗、酶、抗生素、激素等药品的生产；生物化学的检查药品、免疫学及细菌学的检查药品；血液、细菌、动脉、骨骼、皮肤、角膜、神经组织及各种器官长期保存等。 冻干机板层的制冷温度范围和冷凝器温度大致有三种类型。 一种是冷冻系统采用单级制冷压缩循环，板层的制冷温度约为-35~-40℃。冷凝器的制冷温度为-50℃左右。这种冻干机适用于一些容易冻干产品的生产。 另一种是冷冻系统采用双级制冷压缩循环，板层的制冷温度约为-45~-50℃。冷凝器的制冷温度为-65℃左右。这种冻干机适用于大部分医药产品的冻干。 再一种是冷冻系统采用复叠式制冷循环，板层的制冷温度约为-55~-60℃。冷凝器的制冷温度为-75℃左右。这种冻干机适用于一些特殊产品的冻干。 上述温度范围的选择是根据冻干产品的共晶点所决定的，共晶点低的产品要求板层的制冷温度低些，冷凝器的温度也相应地低些。 此外，板层温度的均匀性，对产品质量的一致性有很大的影响，温度均匀性好，则冻干产品质量的一致性也越好，因此宜选择使用中间流体间接制冷板层的冻干机。这种冻干机板层为空心夹层结构，内部有许多流体通道，板层的制冷和加热均通过中间流体的循环来实现，因此板层温度均匀一致。中间流体最好是使用对人无害、不腐蚀设备、热稳定性好和对药品惰性低粘度硅油。 冻干机板层的加热温度最高均为70~80℃。所有冻干机均差不多。 在空载的情况下，冻干箱的降温速度一般应在1~2小时之内达到指标规定的最低温度，冷凝器应在1小时内达到指标规定的最低温度。 关于冻干箱的真空度，过去的观点认为真空度是越高越好，现在的观点认为真空度应在一个合理的范围之内。真空度太高了，不利于传热，干燥速度反而下降。但无论如何冻干箱的空载极限温度应达到110-2毫巴以上。使用中若不需要很高的真空度时，可以通过真空度调节装置来控制真空度，使真空度控制在所需范围之内，因此真空度调节装置是应该选用的。 冻干箱空载的抽空速度，应在半小时之内从大气压抽到110-1毫巴。2小时内达到110-2毫巴以上的真空度。 真空冷冻干燥技术在生物工程、医药工业、食品工业、材料科学和农副产品深加工等领域有着广泛的应用。药品冷冻干燥包括西药和中药两部分。西药冷冻干燥在国内已经得到了一定的发展，很多较大型的制药厂都有冷冻干燥设备。在中药方面，目前还只局限在人参、鹿茸、山药、冬虫夏草等少量中药材的冻干，大量的中成药还没有采用冻干工艺，与国外差距较大。 在生物技术产品领域，冻干技术主要用于血清、血浆、疫苗、酶、抗生素、激素等药品的生产；生物化学的检查药品、免疫学及细菌学的检查药品；血液、细菌、动脉、骨骼、皮肤、角膜、神经组织及各种器官长期保存等。