离线在线两用固相萃取仪

SPE-04离线在线两用固相萃取仪具有以下四种功能: 1) 离线固相萃取; 2) 在线固相萃取; 3)在线衍生; 4)HPLC自动进样。在在线固相萃取模式中首次引进了二阶在线固相萃取。 

二阶在线固相萃取

固相萃取（SPE）或柱净化与色谱分析的在线结合目前主要有两种方式。一种是使用切换阀，将固相萃取柱和色谱分析柱连接，让色谱流动相把固相萃取柱上富集的样品全部转移到色谱分析柱（直接方式）。另一种是间接方式，采用和离线固相萃取一样的净化方式。样品组分收集后， 用萃取仪内置的进样器取10-20微升的组分注入色谱分析柱。

直接方式的在线固相萃取具有灵敏度高和处理速度快的特点。 因为固相萃取柱富集的样品全部转移到了色谱分析柱，样品处理步骤也比较简单。以大体积水样的处理为例，离线固相萃取一般要萃取500毫升样品。组分收集后会浓缩到1毫升，然后取20微升进样。色谱分析实际利用的样品只有10毫升。如果采用直接方式的在线固相萃取，只要上样10毫升， 就能获得相同的灵敏度， 而样品处理时间可以从2小时减少到20分钟。直接方式的在线固相萃取要求萃取柱可以多次反复使用，因为连接在高压切换阀上的萃取柱不容易更换。 另外使用溶剂的性质要和色谱分析柱匹配 ，否则色谱峰变宽会影响分离效果。 由于这两条限制，采用的固相萃取柱一般只能是反相柱，而样品的成分要求比较干净。 目前这种方式主要是用于饮用水的分析。

使用间接方式的在线固相萃取， 可以不受上述两项条件的限制。供选择的固相萃取柱比较多，净化效果也比较好。 这种间接在线固相萃取的缺点是灵敏度比较低， 因为收集的组分只有一小部分用于色谱分析。 因此， 间接方式固相萃取比较适合样品成分比较复杂而灵敏度要求不太高的应用。

为了克服上述两种方式的局限， 加拿大博朗科技利用SPE-04的特有的功能，引进了二阶在线固相萃取。 它先采用间接方式的在线固相萃取作为第一阶段的样品净化， 组分经过溶剂修饰后再通过直接在线固相萃取进行富集。这种二阶在线固相萃取，先用第一阶固相萃取柱去除大部分样品的干扰物。所使用的萃取柱和普通的离线固相萃取一样， 可以是C18、 离子交换、 石墨化炭黑、亲和色谱等类型。第二阶固相萃取的作用是富集和进一步净化。因为样品已经比较干净， 第二阶固相萃取柱的寿命得以显著延长。

使用SPE-04实现大体积进样

 液相色谱分析要求样品的溶剂应该和色谱流动相的组成相近， 否则容易造成峰变形或变宽。另外在进样量方面， 对于4.6毫米的色谱柱的进样体积一般为10-20微升。 如果进样体积过大，不仅不会提高灵敏度， 反而会因为峰变宽而影响分离效果。对于像氯霉素一类保留时间短的极性分析物，样品溶剂组成和进样体积的影响尤其明显。 通过使用SPE-04的在线溶剂修饰功能和第二阶萃取柱的富集功能，可以在样品溶剂不不匹配的情况下将进样体积增加到500微升而不影响分离效果和峰形。

在线衍生化

仪器还具有在线衍生的功能。目标化合物经SPE净化后, 可以自动和一或二种衍生化试剂混合。 在控温的条件下(30~80oC)反应后, 引入HPLC。虽然一些高档的HPLC自动进样器也有柱前衍生的功能, 但是只能在室温下进行, 既限制了衍生化试剂的选择范围, 又有可能因为温度波动或净化不好增加误差。 

高效耐用的在线萃取柱

SPE-04利用管路集成技术实现了在线萃取柱的快速再生和有效减少了峰型扩散。即使上样20毫升仍旧可以保证峰型不扩散。萃取柱上的颗粒物可以快速除去。每个在线萃取柱可以使用50-100次以上 （河水、自来水）。