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小鼠三叉神经星形胶质细胞

小鼠三叉神经星形胶质细胞

价格: 1-4700

品牌:联祖

供货周期: 现货

货号:LZ-YX10258

规格:5×105

其他参数

  • 用途:仅用于科研研究实验

本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗
小鼠三叉神经星形胶质细胞

细胞简介:

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小鼠三叉神经星形胶质细胞分离自三叉神经组织;三叉神经为最粗大的混合性脑神经,含一般躯体感觉和特殊内脏运动两种纤维。其特殊内脏运动纤维起于脑桥中段的三叉神经运动核,纤维组成三叉神经运动根,由脑桥基底部与脑桥臂交界处出脑,位于感觉根下内侧,最后进入三叉神经第3支下颌神经中,经卵圆孔出颅,随下颌神经分支分布于咀嚼肌等。运动根内还含有三叉神经中脑核有关的纤维,主要传导咀嚼肌的本体感觉。三叉神经内以躯体感觉神经纤维为主,这些纤维的细胞体位于三叉神经节(半月节)内,该神经节位于颅中窝颧骨岩部尖端的前面三叉神经压迹处,为硬脑膜形成的美克尔腔包裹。神经胶质细胞是神经组织中除神经元以外的另一大类细胞,也有突起,但无树突和轴突之分,广泛分布于中枢和周围神经系统。在哺乳类动物中,神经胶质细胞与神经元的细胞数量比例约为10:1。在中枢神经系统(CNS)中的神经胶质细胞主要有星形胶质细胞、少突胶质细胞(与前者合称为大胶质细胞)和小胶质细胞等。传统认为胶质细胞属于结缔组织,其作用仅是连接和支持各种神经成分,其实神经胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用,在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织。星形胶质前体细胞主要表达Vimentin,而成熟之后表达Vimentin和胶质纤维酸性蛋白(GFAP),故GFAP被认为是星形胶质细胞成熟的标志物。

培养信息:

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培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

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注意事项如下:

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(1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强对无菌操作的观念,以预防为主,一旦污染,通常难以消除。

(2)培养基:所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同,对培养基的要求也会有一定差异,必要时可通过预实验选择适宜的培养基。

(3)小牛血清:小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清,就应坚持使用至实验结束。

(4)胶原酶溶液:必须新鲜配制,贮存时间过长(即使是低温保存在-20℃),也会影响消化效力,导致消化时间过长,增加细胞损伤。

(5)L-谷氨酰胺:几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求,细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质,缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定,在4℃冰箱贮存两周以上时,应重新加入相同量的谷氨酰胺。

(6)静置培养:原代细胞在消化分离后,放置于CO2培养箱的前24~48h(必要时达到72小时)内,应处于绝对静止状态,切忌频繁取出培养瓶观察生长情况,这会使原代分离细胞难以附着于壁面,更谈不上伸展和增殖。

(7)消化时间:通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可,因为此时组织颗粒已松散,稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞,过长的消化时间往往导致细胞损伤加重,细胞培养成活率降低。

(8)其他生长因子:经过以上处理,一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞,也可以考虑添加一些特殊的生长因子,例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外,内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用,但费用较高。

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原代细胞培养具体步骤如下:

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1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。

3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。

4、剪切:用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。

5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。

7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。

8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。

下列是公司正在出售的产品:
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JYBL-Ⅳ脱钙液食管鳞状癌细胞
Kovac试剂小细胞肺癌
Luxol Fast Blue染色液小鼠成纤维细胞
Luxol Fast Blue髓鞘染色液小鼠肝癌细胞
Mallory PTAH染色液(化学氧化法)类B细胞淋巴癌细胞
Mallory PTAH染色液(自然氧化法)骨髓瘤细胞
Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH化学氧化法)宫颈癌细胞
Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH自然氧化法)肝癌细胞
MASSON三色染色试剂盒(亮绿,用于胶原纤维染色)纤维肉瘤细胞
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Masson三色染色液(固绿法)肝癌细胞
Mayer苏木素染色液胆管癌细胞
MDC染色液外周血B淋巴细胞
oechst 33258染色液(即用型) 套细胞淋巴瘤细胞
Plank-Rychlo脱钙液急性T淋巴细胞白血病细胞
PluronicF-127结肠癌细胞
Pollak三色染色液神经胶质瘤细胞小鼠三叉神经星形胶质细胞






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