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小鼠小肠隐窝上皮细胞

小鼠小肠隐窝上皮细胞

价格: 1-3400

品牌:联祖

供货周期: 现货

货号:LZ-YX9234

规格:5×105

其他参数

  • 用途:仅用于科研研究实验

本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗
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小鼠小肠隐窝上皮细胞

细胞简介:

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小鼠小肠隐窝上皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现,在十二指肠末段和空肠头段极发达,向下逐渐减少和变矮,至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛,是由上皮和固有层向肠腔突起而成,形状不一,以十二指肠和空肠头段最发达。绒毛于十二指肠呈叶状,于空肠呈指状,于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍,绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺,又称肠隐窝,故小肠腺与绒毛的上皮是连续的,小肠腺直接开口于肠腔。

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培养信息:

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培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

注意事项如下:

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(1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强对无菌操作的观念,以预防为主,一旦污染,通常难以消除。

(2)培养基:所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同,对培养基的要求也会有一定差异,必要时可通过预实验选择适宜的培养基。

(3)小牛血清:小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清,就应坚持使用至实验结束。

(4)胶原酶溶液:必须新鲜配制,贮存时间过长(即使是低温保存在-20℃),也会影响消化效力,导致消化时间过长,增加细胞损伤。

(5)L-谷氨酰胺:几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求,细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质,缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定,在4℃冰箱贮存两周以上时,应重新加入相同量的谷氨酰胺。

(6)静置培养:原代细胞在消化分离后,放置于CO2培养箱的前24~48h(必要时达到72小时)内,应处于绝对静止状态,切忌频繁取出培养瓶观察生长情况,这会使原代分离细胞难以附着于壁面,更谈不上伸展和增殖。

(7)消化时间:通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可,因为此时组织颗粒已松散,稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞,过长的消化时间往往导致细胞损伤加重,细胞培养成活率降低。

(8)其他生长因子:经过以上处理,一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞,也可以考虑添加一些特殊的生长因子,例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外,内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用,但费用较高。

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原代细胞培养具体步骤如下:

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1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。

3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。

4、剪切:用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。

5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。

7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。

8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。

下列是公司正在出售的产品:
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纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰乙酸ELISA试剂盒
细胞样品细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰肝素酶ELISA试剂盒
组织样品细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰辅酶A羧化酶合成酶ELISA试剂盒
纯化细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰胆碱酯酶ELISA试剂盒
真菌/酵母细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰胆碱受体抗体ELISA试剂盒
植物细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒乙酰胆碱ELISA试剂盒
细胞色素C1含量差异光度法定量检测试剂盒乙醛脱氢酶18家族成员A1ELISA试剂盒
细胞色素C+C1总含量差异光度法定量检测试剂盒乙醛脱氢酶ELISA试剂盒
细胞色素a+a3总含量差异光度法定量检测试剂盒乙基丙二酸ELISA试剂盒乙基丙二酸ELISA试剂盒ELISA试剂盒
细胞色素bbH+bL+bII)总含量差异光度法定量检测试剂盒乙肝表面抗原大蛋白ELISA试剂盒
细胞色素bL+bH总含量差异光度法定量检测试剂盒乙醇脱氢酶ELISA试剂盒
细胞色素bII含量差异光度法定量检测试剂盒乙胺碘呋酮ELISA试剂盒小鼠小肠隐窝上皮细胞
线粒体功能詹纳斯绿BJGB)染色试剂盒胰脂肪酶ELISA试剂盒
纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒胰抑制素ELISA试剂盒






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