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- 组织来源:脂肪组织
- 用途:仅用于科研研究实验
本司产品仅用于科研，不用于临床诊断和治疗
1.产品名称：小鼠脂肪间充质干细胞
2.组织来源：脂肪组织
3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
4.细胞简介：
小鼠脂肪间充质干细胞分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群，具有自我更新能力和多向分化潜能，被称为脂肪组织来源的间充质干细胞，简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比，在来源、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似。但是，脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞，且获取过程中对机体损伤更小，是更为理想的自体干细胞源。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态，BrdU可标记其细胞核。
意事项如下：
（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强对无菌操作的观念，以预防为主，一旦污染，通常难以消除。
（2）培养基：所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同，对培养基的要求也会有一定差异，必要时可通过预实验选择适宜的培养基。
（3）小牛血清：小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清，就应坚持使用至实验结束。
（4）胶原酶溶液：必须新鲜配制，贮存时间过长（即使是低温保存在-20℃），也会影响消化效力，导致消化时间过长，增加细胞损伤。
（5）L-谷氨酰胺：几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求，细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质，缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定，在4℃冰箱贮存两周以上时，应重新加入相同量的谷氨酰胺。
（6）静置培养：原代细胞在消化分离后，放置于CO2培养箱的前24～48h（必要时达到72小时）内，应处于绝对静止状态，切忌频繁取出培养瓶观察生长情况，这会使原代分离细胞难以附着于壁面，更谈不上伸展和增殖。
（7）消化时间：通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已松散，稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞，过长的消化时间往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。
（8）其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞，也可以考虑添加一些特殊的生长因子，例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外，内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用，但费用较高。
原代细胞培养具体步骤如下：
1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。
4、剪切：用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。
下列是公司正在出售的产品：
| 人心肌细胞-暂不提供 | 大鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒 | Caspase 9荧光法检测试剂盒(AFC) |
| 人心肌成纤维细胞 | 间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒 | Caspase 6荧光法检测试剂盒(AFC) |
| 人小气道上皮细胞 | 人外周血淋巴细胞分离液小鼠脂肪间充质干细胞 | Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC) |
| 人小气道平滑肌细胞 | 间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒 | DAPI染液(即用型) |
| 人小梁网细胞 | 间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒 | CCCP细胞凋亡诱导剂(50mM) |
| 人小肠平滑肌细胞 | 细胞培养基 > 细胞系专用培养基 | DAPI溶液(1mg/ml) |
| 人胃黏膜上皮细胞 | 786-O 细胞专用培养基 | DAPI溶液(5mg/ml) |
| 人胃成纤维 | 5637 细胞专用培养基 | DAPI溶液(即用型) |
| 人胃癌组织源细胞 | A3 细胞专用培养基 | Hoechst 33258细胞蓝色荧光染料 |
| 人胃癌组织源成纤维细胞 | A7r5 细胞专用培养基 | Hoechst 33342细胞蓝色荧光染料 |
| 人外周血中性粒细胞 | A172 细胞专用培养基 | Hoechst 33258 染色液(即用型) |
| 人外周血树突状细胞(DC细胞) | A-204 细胞专用培养基 | Hoechst 33342 染色液(即用型) |
| 人外周血淋巴细胞 | A375 细胞专用培养基 | DAPI双链DNA染料 |
| 人外周血来源内皮祖细胞 | A431 细胞专用培养基 | MTT(噻唑兰) |
| 人外周血单个核细胞 | A498 细胞专用培养基 | MTT细胞增值与毒性检测试剂盒 |
| 人外周血CD8+T细胞 | 769-P 细胞专用培养基 | p53抑制剂(PFT-α) |
| 人外周血CD3+T细胞 | 143B 细胞专用培养基 | FITC-Brdu细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) |
| 人胎盘绒毛膜滋养层细胞 | 95-D 细胞专用培养基 | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10) |
