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钦诚生物 | 一周
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其他参数
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞基本属性
英文名称 | Sp2/0:Sp20 | 细胞名称 | |
货号 | P-X1107 | 产品分类 | 小鼠细胞系 |
组织来源 | 脾脏 | 培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
商品介绍:
细胞名称:Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 淋巴母细胞样
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推荐换液频率 2~3次/周
注意事项 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
背景描述 Sp2/0-Ag14细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。Sp2/0-Ag14细胞不分泌免疫球蛋白,对20μg/ml的8-氮niao嘌呤有抗性,对HAT比较敏感;Sp2/0-Ag14细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤;鼠痘病毒阴性。
组织来源 脾脏
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 骨髓瘤细胞
生物安全等级 1
抗原表达情况 H-2d
保藏机构 ATCC; CRL-1581 ATCC;CRL-8287 DSMZ;ACC-146 ECACC;85072401
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
超氧化物歧化酶1抗体(铜/锌过氧化物歧化酶SOD) Anti-SOD1/SOD | 神经细胞囊泡循环蛋白1抗体 Synaptogyrin 1 |
锌指蛋白277抗体 ZNF277 | 蛇毒蛋白抗体(中华眼镜蛇) Snake poison Protein |
丙酰辅酶A羧化酶β链抗体 PCCB | Michel固着液 |
卵泡抑素相关蛋白5抗体 | 大鼠肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)elisa检测试剂盒 |
DNAJC9蛋白抗体 DNAJC9 | 小细胞跨膜糖化蛋白抗体 SMAGP |
猪疱疹病毒1型 ICP4蛋白抗体 ICP4/IE180 | 转录因子LBX2抗体 LBX2 |
FSTL5 | 人白三烯B4(LTB4)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠速激肽受体2(TACR2)elisa检测试剂盒 | 植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)elisa检测试剂盒免费代测 |
人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)elisa检测试剂盒 | 小鼠激肽释放酶1(KLK1)elisa检测试剂盒 |
核糖核酸结合蛋白2抗体 Anti-PTBP2 | 大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa检测试剂盒 |
血液(THROMBIN)活性比色法定量检测试剂盒 | 特异性解旋酶抗体 Anti-SMARCA6/HELLS |
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冠状病毒抗体 SARS putative orflab polyprotein | PE-CY5标记的驴抗人IgG H&L |
核干细胞因子鸟嘌呤核苷酸结合蛋白3抗体 Nucleostemin | 半乳糖变旋酶抗体 Mutarotase |
转录因子Pax6抗体 Anti-PAX6 | Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5 |
A型流感病毒PB1-F2抗体 | Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞Influenza A PB1-F2 |
胞粘蛋白结合调节蛋白抗体 | PSCDBP |