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SW579人甲状腺癌细胞

SW579人甲状腺癌细胞

价格: 1350

品牌:抚生

供货周期: 现货

货号:A01X983

规格:1×106

其他参数

  • 种属:人
  • 产品分类:人细胞系
  • 细胞形态:上皮细胞样
  • 生长特性:贴壁细胞
  • 用途:仅供科研研究实验

细胞详情:
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SW579人甲状腺癌细胞细胞别称:SW-579; SW 579;SW579;人甲状腺癌细胞

种属来源:人

年龄性别:男;59岁

组织来源:甲状腺;鳞癌

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

背景简介:SW579 [SW 579, SW-579]细胞源于一位59岁的白人男性患者的甲状腺鳞癌组织;SW579 [SW 579, SW-579]细胞在裸鼠中成瘤(产生Ⅲ级恶性纺锤状巨细胞瘤)。在裸鼠中成瘤(产生三级恶性纺锤状巨细胞瘤)。

生物安全等级:1

细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测:无

基因表达情况:Blood Type O; Rh+

保藏机构:ATCC; HTB-107; 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

培养基:90%DMEM+10%FBS+PS

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

倍增时间:

STR鉴定位点melogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:13;D16S539:11;D18S51:15,17,18;D19S433:13,14;D21S11:29,31;D2S1338:17,18;D3S1358:15,18;D5S818:11;D7S820:8,9;D8S1179:11,13;FGA:21,24;TH01:8,9.3;TPOX:8,10;vWA:14,18;

商品属性:

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产品名称

SW579人甲状腺癌细胞

鉴定

STR鉴定

种属

货号

A01X983

温度

液氮

细胞形态

上皮细胞样

英文名称

SW579:SW579

生长特性

贴壁生长

细胞系操作步骤:

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(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。


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细胞处理:

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1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

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