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钦诚生物 | 一周
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其他参数
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞基本属性
英文名称 | sv-huc-1:svhuc1 | 细胞名称 | |
货号 | P-X974 | 产品分类 | 人细胞系 |
组织来源 | 输尿管,输尿管上皮 | 培养基 | Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S |
商品介绍:
细胞名称:sv-huc-1人膀胱上皮永生化细胞
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项 该细胞较难消化,注意延长消化时间,消化到细胞收缩变圆,轻拍培养瓶侧边,细胞可以滑落方可终止消化。
参考资料(来源文献)
背景描述 SV-HUC-1细胞是正常输尿管组织用SV40病毒转染建株的。反复用非洲绿猴肾细胞平板测试检测传染性SV40的生成,结果都呈阴性;SV-HUC-1细胞在胁迫(如曝露于化学试剂)下可能激活病毒。
年龄(性别) 男性;11岁
组织来源 输尿管,输尿管上皮
细胞类型 转化细胞系
生物安全等级 BSL-2
致瘤性 No, nude mice.
基因表达情况 uroepithelial keratins; SV40 T antigen
保藏机构 ATCC; CRL-9520
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大综合征相关蛋白抗体 Anti-phospho-RASA1 (Tyr460) | 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1前体蛋白抗体 CCL1 precursor |
锌指蛋白829抗体 ZNF829 | 肾素/血管紧张素形成酶Ren1抗体 Renin |
雌诱导的转录调制器抗体 SLTM | 高质敏感比色法定量检测试剂盒 |
FXYD3蛋白抗体 | 大鼠肺炎病毒抗体(PV-Ab)elisa分析检测试剂盒 |
eIF5A2蛋白抗体 eIF5A2 | 锌指蛋白529抗体 ZNF529 |
转运RNA核糖转移酶结构域蛋白QTRTD1抗体 QTRTD1 | 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶3C抗体 KMT3C |
FXYD3 | 人登革热(DF)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠血管内皮细胞蛋白C受体(PROCR)elisa检测试剂盒 | 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性终点比色法定量检测试剂盒 |
小鼠骨钙素(OT)elisa检测试剂盒 | 小鼠细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa检测试剂盒 |
原钙粘附蛋白11X抗体 Anti-PCDH11X | HPLC试剂盒 |
BAX蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 | 14-3-3σ抗体 Anti-14-3-3 sigma |
泛素激活酶E1抗体 Anti-UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme | DPCR1蛋白抗体 DPCR1 |
核酸内切酶III样蛋白1抗体 NTH1 | Cy5标记的羊抗兔IgG H&L |
黑色素瘤相关抗原D1单克隆抗体 MAGED1 | 层粘蛋白α4抗体 Laminin alpha 4 |
细胞膜钙ATP酶4抗体 Anti-PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase | Goat Anti-Rabbit IgG H&L / Cy5 |
亲联蛋白2抗体 | sv-huc-1人膀胱上皮永生化细胞Junctophilin-2 |
β1,3-N-乙酰糖基转移酶抗体 | Radical Fringe |