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- 产品分类:核酸修饰酶系列
- 包装:盒装
- 用途:用于科研实验
T4 UvsX Recombinase
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1402-300μg | 300μg | T4 UvsX Recombinase |
P-PR1402-3mg | 3mg | T4 UvsX Recombinase |
产品介绍：
描述:
UvsX 重组酶，来源于 T4 噬菌体，是 RecA/Rad51家族的同源体。RecA/Rad51 重组酶家族在双链 DNA 断裂的无误修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。
T4 UvsX 重组酶可与其他重组酶一起锚定在单链 DNA 上并激活其在其他双链 DNA 上寻找同源序列，以进一步完成链置换。经检测，该酶无核酸酶活性。
储存：
置于-20°C 可保存 1 年，-80°C 长期保存，短期使用置于 4°C，保存一个月，避免反复冻融。
热失活：60°C，10min。
酶储存液：50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM
EDTA, 10% Trehalose, pH 7.5。2xRPA BufferMix：包含反应缓冲盐、ATP、磷酸肌酸、dNTP、PEG、DTT、BSA 等，可用于 RPA 扩增试验。该试剂 4°C
条件下放置 1 个月性能无下降。
基于本蛋白进行 RPA 反应测试的全套试剂
用于 RPA 扩增的测试引物与探针
CPV-F（20uM） CACTTACTAAGAACAGGTGATGAATTTGCTACAG
CPV-R（20uM） AGTTTGTATTTCCCATTTGAGTTACACCACGTCT
Probe（10uM） CCTCAAGCTGAAGGAGGTACTAACTTTGGT[dT-BHQ1]
[THF][dT-FAM]ATAGGAGTTCAACAAG -(C3)
Canine parvovirus type 2,VP2
加入 1μl 的模板 DNA，上机反应前加入 1.25 μl 的 280 mMMg(OAC)2（终浓度 14 mM），总反应体积 25 μl。混合均匀，并离心，置于 39-42℃条件下反应 30min。
2. 进行荧光 RPA 扩增在进行荧光检测时体系中，额外加入 0.3 μl 的 10μM Probe（120 nM的终浓度）和 50U 的 Exonuclease III（2U/μl 的终浓度），即可进行荧光检测。本方法应用原理为 ExoIII 切割 THF 位点，使荧光与猝灭基团分离，报告荧光信号。
特别说明：
（1） 以上 RPA 扩增测试属于蛋白功能性测试，按照以上实验操作流程，可获得 RPA 扩增产物。进一步的优化，包括：X、Y、GP32、聚合酶、反应 Buffer，甚至加样顺序，均可能进一步提高 RPA 的扩增性能。
（2）关于 DNA 聚合酶的选择， 测试了三种常见的 DNA聚合酶，在进行荧光法测定时，推荐的选择顺序依次为 Bst 4.0>Bsu> Sau，且在 42℃条件下，总能获得最快的扩增速度，且荧光信号更强。在 Basic 扩增中 Sau 表现出特异性扩增能力更佳。
（3）关于 RPA 的灵敏度与非特异扩增，在 Basic 试剂的扩增中，仍然存在非特异扩增产物，这需要进一步优化反应组分及引物序列。在使用荧光探针法时，但由于特异性探针的存在，非特异扩增产物通常无荧光信号值，但此时会影响检测灵敏度。GP32 蛋白的
浓度增加会显著降低非特异性扩增，但会导致扩增速度减缓，此时需要同步增加 X 与 Y 蛋白的用量，以维持 RPA 的扩增速度。
（4）据文献报道，在进行试纸条 RPA 实验时，倾向使用 Nfo 内切酶又名 Endonuclease IV， 来对扩增探针进行切割，但 未予测试，目前无法提供相应参数。
（5）RPA 反应 Buffer 对扩增至关重要，轻微的浓度差异，均可导致扩增效率大幅下降，甚至失败。RPA BufferMix 为粘稠试剂，使用时务必保证加样准确，Tip 头中的残液务必完全打入 EP 管中。
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品：
小鼠含STIP1源物U-框蛋白1(STUB1)elisa检测试剂盒 | 富含半胱氨酸分泌蛋白1抗体 CRISP1 |
大鼠白介素2可溶性受体α链(sIL-2Rα/CD25)elisa检测试剂盒 | 钙结合线粒体载体蛋白抗体 SLC25A12 |
类人猿降钙素(CT)elisa分析检测试剂盒 | 抑癌基因NDRG3抗体 NDRG3 |
石蜡切片脂肪组织染色试剂盒 | Tuberin样蛋白1抗体 GARNL1 |
HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒标准曲线定量PCR | ZCCHC8蛋白抗体 ZCCHC8 |
豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa检测试剂盒 | 原钙粘蛋白γB4抗体 PCDHGB4 |
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1号染色体开放阅读框104抗体 C1orf104 | 维甲酸诱导蛋白3抗体 RAI3 |
卷曲螺旋结构域蛋白58抗体 CCDC58 | 石蜡切片组织衰老特异性晚期脂褐素铁还原法 |
跨膜蛋白76/TMEM76抗体 HGSNAT | AmCyan蓝色荧光蛋白单克隆抗体 AmCyan |
AF680标记的酪氨酸羟化酶抗体 Tyrosine Hydroxylase, Alexa Fluor 680 conjugated | 大鼠中性粒细胞趋化因子(CINC)elisa检测试剂盒 |
PE-Cy7标记小鼠CD4单克隆抗体 Mouse CD4/PE-Cy7 | PE标记人CD8单克隆抗体 human CD8-PE |
兔多肽YY(PYY)elisa分析检测试剂盒 | 信号通路Wnt1抗体 Wnt1 |
细胞培养液抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 成纤维细胞生长因子受体底物2抗体 FRS2 |
锌指蛋白771抗体 ZFP771 | T4 UvsX Recombinase丝氨酸蛋白酶抑制剂SPINK8抗体 SPINK8 |
单核细胞趋化蛋白3抗体 MCP3 | 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体 Os05g0477200 protein |
