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其他参数
Super ECL Substrate
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1342-50 ml | 50 ml | Super ECL Substrate |
P-PR1342-500ml | 500ml | Super ECL Substrate |
产品介绍:
描述:
超敏 ECL 显色液用于 Western、Northern 和 Southernblot 分子杂交的化学发光检测,比传统化学显色法灵敏度高,可达 pg 水平。原理是采用新型发光底物(Luminol),其与辣根过氧化物酶反应时产生很强的发光信号,在暗室中对X-光片感光,以此检测微量蛋白而获得理想的实验结果。海基增强型 ECL 显色液具有灵敏度高,持续时间长等特点。
应用
在 Western 印迹分析,核酸杂交以及 EMSA 实验中,HRP标记的二抗或探针与靶分子结合再与底物反应产生可见光。
储存:2-8°C,Super ECL A 要求避光保存。
操作方法:
1.按每平方厘米膜面积用 0.1-0.2 ml 配置显色液:根据显色液的需要量,取等体积 A 液和 B 液,混匀后避光保存备用;该显色液必须现配现用。
2.2. 取出膜,平放在干净的保鲜膜上,膜的正面(蛋白质面)朝上,在膜的中央加适量的配置好的显色液(6×8 cm 的膜加 2 ml 显色液),溶液向四周迅速扩散,覆盖所有膜面。室温保温 5 分钟左右,在此过程中请仔细观察信号的出现。注意:如果信号强,在暗室中能很快看到阳性信号出现。
3.3. 待信号出现且稳定后,用镊子夹起膜,除去多余的显色液,平放在干净的保鲜膜上,膜的正面(蛋白质面)朝上,在转移膜的上面再覆盖一层保鲜膜,除去保鲜膜与转移膜之间的空气泡,请务必保证保鲜膜是干净的,不被其他杂物或液体污染。
4.4. 在暗室中,将膜的正面对着 X-光片,放入暗盒。第一次曝光时间在 1 分钟左右(有经验的操作者可以根据信号的强弱自行决定),立即按要求对 X-光片进行显影和定影,确定最佳曝光时间。曝光时间从数秒到数小时不等;特别弱的过夜曝光也可。
注意事项:
1.PVDF 膜较硝酸纤维膜能更好的结合蛋白,因此呈现较强的信号。选高质量的 PVDF 膜;尽可能不用 Nylon 膜。
2.2.与抗体结合以后,要保证膜处于湿润状态,否则会导致背景较高。
3.3.没有信号的原因:有些抗体不识别变性抗原,有时需要考虑电泳过程对蛋白质结构的影响;样品中无待测蛋白质或含量过低;一抗效价低,用量少,可适当增加一抗的用量;
4.4.背景过高原因:转移膜封闭不充分;与抗体孵育后洗涤不彻底;膜在处理过程中过干;二抗用量过多等。
5.5.注意及时更换显影液、定影液。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
细胞钙钠交换体(NCX)蛋白表达比色法定量检测试剂盒 | 钙反应因子抗体 CDKN2AIP |
犬白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒 | 甘油吸收/转运蛋白GUP1抗体 HHATL |
小鼠白介素23(IL-23)elisa检测试剂盒 | 原卟啉氧化酶3抗体 Coproporphyrinogen III Oxidase |
大鼠质细胞源性神经营养因子(GDNF)elisa检测试剂盒 | X染色体开放阅读框56抗体 CXorf56 |
大鼠基质细胞衍生因子-1α SDF-1α elisa检测试剂盒 | β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体 Mint3 |
猪白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒 | 增生肉蛋白1抗体 TMEFF2 |
嗅觉受体2A1抗体 OR2A1 | 细胞角蛋白8重组兔单克隆抗体 Cytokeratin 8 |
血红蛋白theta亚型1抗体 HBQ1 | 细胞毒性受体NK-p46抗体 NCR1 |
跨膜蛋白158抗体 TMEM158 | 人p物质(SP)elisa分析检测试剂盒 |
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大鼠γ-氨基丁酸(GABA)elisa检测试剂盒 | 酸性核磷蛋白32家族B抗体 PHAPI2 |
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