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- 产品分类:克隆相关
- 包装:盒装
- 用途:用于科研实验
9N 2.0 DNA连接酶
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1329-2000U | 2000U | 9N 2.0 DNA连接酶 |
P-PR1329-20KU | 20KU | 9N 2.0 DNA连接酶 |
产品介绍：
描述：9N 2.0 DNA 连接酶（又名 9 oN DNA Ligase）能够催 化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条 相邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二 酯 键 相 连 。 该 酶 来源于 极 度 耐 热 的 海 底 超 嗜 热 古 菌 （Thermococcus sp.）9°N 菌株中克隆的连接酶基因，在 45℃-90℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突 变，使得耐受更高的温度，在 90℃孵育 15min 仍然保留 50% 以上的活性，因此其适用于：（1）高温条件下，连接 DNA 链上的切刻位点；（2）与 PCR 反应条件兼容可用连接酶检 测反应；（2）连接酶链式反应，对等位基因进行特异性检测。
储存方法：
-20℃可保存 2 年。
活性定义：1 单位指 50μl 反应体系中，45℃ 条件下，15 分
钟内能使 50% 的 1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段（12
bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。
1X 9N DNA 连接酶反应缓冲液
10 mM Tris-HCl，600μM ATP，2.5 mM MgCl2，2.5 mM
DTT，0.1% Triton X-100（pH 7.5 @ 25℃），45℃ 温育。
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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