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Sybr Green I 20× for PCR(荧光信号增强剂)

Sybr Green I 20× for PCR(荧光信号增强剂)

价格: 280

品牌:派瑞曼

供货周期: 现货

货号:P-PR1140

规格:1 ml

其他参数

  • 产品分类:PCR及RT-PCR
  • 包装:盒装
  • 用途:用于科研实验

Sybr Green I 20× for PCR(荧光信号增强剂)

商品属性:

货号

规格

产品名称

P-PR1140-1 ml

1 ml

Sybr Green I 20× for PCR(荧光信号增强剂)

产品介绍

SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800~1000倍。在PCR反应体系中,加入过量SYBR Green I荧光染料,它特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中的SYBR Green I染料分子荧光不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。
1.使用浓度对荧光PCR结果的影响
SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出。而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为1×到0.2×之间。
2.Mg2+浓度的影响
提高Mg2+浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,Mg2+浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5~3mM。

储存条件:

 -20°C保存。

注意事项:

规格

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pcr相关试剂实验结果分析:

PCR实验结果的分析涉及多个方面,‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等,‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:‌

循环次数过多:‌增加模板量减少循环次数,‌缩短退火时间及延伸时间,‌或改用两种温度的PCR循环,‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低:‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增,‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题:‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题,‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题:‌运输储存不当可能引起试剂盒失效,‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板:‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果:‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果,‌需要注意以下几点:‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染,‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析,‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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