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- 产品分类:PCR及RT-PCR
- 包装:盒装
- 用途:用于科研实验
Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1121-1000U | 1000U | Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶 |
产品介绍：
储存条件：-20℃。
产品简介：
热敏UDG酶（Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase）通过切割尿嘧啶碱基与糖骨架之间的 N-糖苷键，从含 dU的DNA 中去除尿嘧啶。该切割生成敏感的无嘧啶位点，在高温和碱性条件下，脱碱基位点易发生水解，导致DNA链断裂成小片段。该酶对RNA和不含有尿嘧啶的DNA无作用。热敏UDG对热敏感，50℃以上的温度下可迅速完全失活。通过在核酸扩增预混液中添加热敏UDG酶，能够有效消除扩增产物的片段污染，防止核酸扩增（PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR和LAMP等等）假阳性。
来源：基因工程大肠杆菌表达的热敏UDG重组酶。
活性单位：一个单位的尿嘧啶DNA糖基化酶定义为在37℃下60分钟内完全降解1μg纯化的单链尿嘧啶DNA所需的酶量。
质量控制：SDS-PAGE 检测纯度大于99%，经检测无核酸外切酶、核酸内切酶和核糖核酸酶活性，无细菌基因组DNA残留。
应用范围：
1.核酸扩增实验中扩增产物污染的预防与清除。
2.DNA中去除尿嘧啶碱基
10×Taq Buffer ：100 mM Tris-HCl，500 mM KCl，20 mM MgCl2，pH 8.8 @ 25°C)
储存缓冲液：
10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol， pH 7.5 @ 25°C
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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