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pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)

pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)

价格: 1560

品牌:派瑞曼

供货周期: 现货

货号:P-PR1230

规格:20 μl

其他参数

  • 产品分类:克隆载体及相关产品
  • 包装:盒装
  • 用途:用于科研实验

pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)

商品属性:

货号

规格

产品名称

P-PR1230-20 μl

20 μl

pPIC9K Seamless   Cloning Kit(线性化质粒)

 产品介绍

保存条件:-20℃保存
产品介绍:
pPIC9K为毕赤酵母表达载体,载体能够使用的毕赤酵母宿主菌。 pPIC9载体大小9276 bp,是融合表达载体,利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。在毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。在载体构建过程中,目的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。本产品提供pPIC9K经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个DNA片段的克隆,多个DNA片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。

操作方法:

1. pPIC9K线性化载体使用方法:
(1) pPIC9K线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列:GAGAGGCTGAAGCTTACGTAGAATTC
下游引物 5’端添加序列:GCGAATTAATTCGCGGCCGC
通过无缝克隆连接到pPIC9K中。
(2) 测序引物
AOX1-F:GACTGGTTCCAATTGACAAGC或alpha-Factor-F:TACTATTGCCAGCATTGCTGCAOX1-R:GCAAATGGCATTCTGACATCC
(3) pPIC9K线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点见下图。

产品特点:


1. pPIC9K为毕赤酵母表达载体,载体能够使用的毕赤酵母宿主菌。
2. pPIC9载体利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。
3. 在毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
4. 无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
5. 可以克隆长片段和多片段DNA。

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pcr相关试剂实验结果分析:

PCR实验结果的分析涉及多个方面,‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等,‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:‌

循环次数过多:‌增加模板量减少循环次数,‌缩短退火时间及延伸时间,‌或改用两种温度的PCR循环,‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低:‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增,‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题:‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题,‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题:‌运输储存不当可能引起试剂盒失效,‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板:‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果:‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果,‌需要注意以下几点:‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染,‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析,‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

公司正在出售的产品:

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生化试剂 pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)由上海博湖生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于PCR试剂 pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应pPIC9K Seamless Cloning Kit(线性化质粒)外,上海博湖生物科技有限公司还可为您提供: P116人白血病细胞、 OVTOKO人卵巢癌细胞、 OVMANA人卵巢癌细胞
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