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- 产品分类:克隆载体及相关产品
- 包装:盒装
- 用途:用于科研实验
pPIC9K Seamless Cloning Kit（线性化质粒）
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1230-20 μl | 20 μl | pPIC9K Seamless Cloning Kit（线性化质粒） |
产品介绍：
保存条件：-20℃保存
产品介绍：
pPIC9K为毕赤酵母表达载体，载体能够使用的毕赤酵母宿主菌。 pPIC9载体大小9276 bp，是融合表达载体，利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。在毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。在载体构建过程中，目的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。本产品提供pPIC9K经EcoRⅠ酶切后的线性化载体，可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
无缝克隆技术可在重组酶的作用下，只需一步反应，便可将片段克隆到任何载体中的任意位置，得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术，具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点，用于单个DNA片段的克隆，多个DNA片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。
操作方法：
1. pPIC9K线性化载体使用方法：
(1) pPIC9K线性化载体当做克隆载体使用，可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列：GAGAGGCTGAAGCTTACGTAGAATTC
下游引物 5’端添加序列：GCGAATTAATTCGCGGCCGC
通过无缝克隆连接到pPIC9K中。
(2) 测序引物
AOX1-F:GACTGGTTCCAATTGACAAGC或alpha-Factor-F:TACTATTGCCAGCATTGCTGCAOX1-R:GCAAATGGCATTCTGACATCC
(3) pPIC9K线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体，图谱及多克隆位点见下图。
产品特点：
1. pPIC9K为毕赤酵母表达载体，载体能够使用的毕赤酵母宿主菌。
2. pPIC9载体利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。
3. 在毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
4. 无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
5. 可以克隆长片段和多片段DNA。
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品：
维生素B7（VB7）含量测试盒 | 四分子交联体13抗体（四旋蛋白） Anti-TSPAN13/NET-6 |
蛋白样品液相法去内试剂盒 | 原钙粘附蛋白α2抗体 Anti-PCDHA2 |
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颉（VALINE）氧化高效液相色谱 （HPLC）分析试剂盒 | 磷酸化Rad51抗体 |
细胞样品氧化酶活性染色试剂盒 | phospho-RAD51 (Tyr315) |
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脑蛋白1抗体 HUCE1 | NR2F6 |
鸟氨酸氨基转移酶抗体 ornithine aminotransferase | 细胞核受体ERBA相关基因2抗体 |
神经调节肽VGF抗体 Anti-VGF/NERP1 | hs-CRP ELISA Kit |
新型核蛋白质1抗体 Anti-NNP1/RRP1 like protein | 转移生长因子β5抗体 Anti-TGF beta 5/ TGF beta 1 |
环指蛋白113A抗体 Anti-RNF113A | 大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa分析检测试剂盒 |
阳离子通道精子相关蛋白3抗体 CATSPER3 | 胰脂肪酶抗体 Pancreatic Lipase |
人甲状旁腺1-34(PTH 1-34)抗体elisa分析检测试剂盒 | 接触蛋白相关蛋白3抗体 CNTNAP3 |
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钾离子通道调节蛋白KCNRG抗体 KCNRG | pPIC9K Seamless Cloning Kit（线性化质粒）防御素β-125/β-defensin 125抗体 DEFB125 |
7号染色体开放阅读框29抗体 C7ORF29 | 二脂酰甘油酰基转移酶抗体 DGAT1 |
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