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获取电话Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1240-16KU | 16KU | Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油 |
产品介绍：
描述：与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比，Bst 3.0 DNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板，该酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性，但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。
在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。该酶在60-65°C之间具有很好的反转录活性，可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录，而Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。
单位定义：
一个活力单位即在 65°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存：-20℃ 可保存 3 年。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
注意事项：
(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度，Isothermo Buffer中没有 Mg2+，通常情况下，在 6-8 mM Mg2+条件下可获得较好的 LAMP 结果。
(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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