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2min DNA/RNA直提试剂盒
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1408-100T | 100T | 2min DNA/RNA直提试剂盒 |
产品介绍:
描述:
本试剂适合从各种组织、体液中快速提取制备 PCR检测级别的基因组 DNA 和 RNA。制备的 DNA 和 RNA 可直接应用于 TaqMan PCR、One-Step PCR、LAMP、RPA 的扩增实验。该试剂制备 DNA/RNA 样品操作及其简单,通常2min 内可完成制备。
储存: 室温保存 6 个月,若长期保存请置于-20℃(5 年)。
适用组织类型
从感染病毒的组织样本中提取病毒 DNA/RNA。
从感染细菌的组织样本中提取细菌 DNA。
从动物口腔唾液拭孖中提取病毒 DNA/RNA。
从植物组织中提取 DNA/RNA。
从血浆、血清中提取病毒 DNA/RNA
操作方法:
1. 动物、植物组织中提取病毒 DNA/RNA将组织样本约 1~10 mg 放入到 1.5mL EP 管中,并加入500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中研磨 1min 左右。研磨完毕后加入 100 μl 的DNA/RNA DirOut-B 溶液,漩涡混合均匀(可短离心将未磨碎的组织去除),取 0.5 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。注意:组织使用量不要超过 50mg,过多的组织量会抑制后续 PCR 反应。
2. 从血清、血浆、唾液等体液中提取病毒 DNA/RNA在 1.5mL EP 管中加入 100 μl 血清、血浆、唾液等液体样本,并加入 500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,漩涡混合30s。漩涡完毕后加入 100 μl 的 DNA/RNA DirOut-B 溶液,漩涡混合均匀,取 0.5 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。
3. 从动物咀嚼过的沙包或拭孖中提取病毒 DNA/RNA剪切部分动物咀嚼过的沙包或拭孖放置到 1.5 ml EP 管中,并加入 500 μl 溶液 DNA/RNA DirOut-A,漩涡混合30s。漩涡完毕后加入 100 μl 的 DNA/RNA DirOut-B 溶液漩涡混合均匀,取 1 μl 的该溶液作为 DNA/RNA 模板,直接用于下游 PCR 等试验即可。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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