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2×Pfu PCR MasterMix(含染料)2×Taq Mix高保真预混液
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1105-1ml | 1ml | 2×Pfu PCR MasterMix(含染料)2×Taq Mix高保真预混液 |
产品介绍:
储存条件:-20℃保存。
制品说明:
本产品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。
本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Pfu PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。2×PfuPCR MasterMix可以纠正DNA扩增过程中的碱基错配,其PCR产物为平端,可直接用平端载体克隆。
本产品有含染料和不含染料两种。含染料产品中有两种染料|(绿色染料和黄色染料),在电泳时会分开以监测迁移进度。青色的染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5kb DNA片段的迁移率相同。黄色的染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快(<50bp)。
产品内容:0.05units/μl Pfu DNA Polymerase (recombinant)、 4mM MgCl2、0.4mM dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余 DNA ;能有效地扩增人基因中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
适用范围:
基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增:DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物不带A,纯化后可直接用平末端载体克隆
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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