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其他参数
15min高产全血基因组DNA提取试剂盒
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1404-50T | 50T | 15min高产全血基因组DNA提取试剂盒 |
产品介绍:
该试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从抗凝全血样本中纯化出高纯度的基因组 DNA,最大限度的去除蛋白、色素、脂类等杂质污染。应用本试剂盒获取的 DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280 为 1.6-1.9。应用本试剂盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。
注意事项:
(1) 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。
(2)gDNA LB1,储存时可能会有白色结晶沉淀,放置于56℃水浴锅溶解后,不影响使用效果。
(3)蛋白酶 K(20 mg/ml)长期保存请储存于-20℃,短期室温保存(6 个月),其它组分储存于室温。
(4)该试剂盒的保质期为 2 年。
操作方法:
(1)样本处理(1.5 或 2 ml EP 管中处理)人抗凝全血:吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 红细胞裂解液中上下颠倒混合均匀,13000rpm 离心 30s,去上清,留白细胞沉淀,用 50 μl 水重悬白细胞沉淀(有少量红细胞残留并不影响 DNA 的产量,如仍然有大量红细胞未裂解,可再次用红细胞裂解液将红细胞裂解)。淋巴细胞分离液分离出的白细胞:直接吸取 50~80 μl 白细胞。有核红细胞抗凝全血(禽血):吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 无菌水中,漩涡震荡混合均匀。
(2)向上述准备好的样品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩涡混合均匀 10s,56℃水浴锅中消化5~30min(长时间消化可提高 DNA 的产量)。
(3)加入 700 μl gDNA BB2 漩涡震荡混合均匀 1min,肉眼观察有无未溶解的血凝块,如果无血凝块,则直接倒入到吸附柱中,13000rpm 离心 1min。注意:如果有未溶解的血凝块,则短离心去除血凝块后,再倒入到吸附柱中,进行后续离心操作。
(5)倒掉废液,向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。
(6)将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心 2min,将残留的乙醇彻底甩干。
(7)将吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer(DNA Elution Buffer 预热到 65℃将提高洗脱产量),室温放置 1min,13,000rpm 离心1min,洗脱液即为基因组 DNA,冷冻保存。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
磷酸二酯酶8A(Phosphodiesterase 8A) | 转运RNA核糖转移酶结构域蛋白QTRTD1抗体 QTRTD1 |
小鼠蛋白激酶Cα(PKCα)elisa检测试剂盒 | 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶3C抗体 KMT3C |
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