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1×Fast Taq MasterMix(purple) (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1091-1ml×5 | 1ml×5 | 1×Fast Taq MasterMix(purple) (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液) |
储存条件:
-20℃保存。
产品介绍:
1×Fast Taq预混液中包括Fast Taq DNA聚合酶,dNTPs,染料及PCR反应所需的缓冲液,是一种即用型PCR扩增试剂。使用时,只需加入引物和DNA模板即可进行PCR扩增, 引物和模板的加入总体积可以在1-10μl间变动,具有很强的可调性。该PCR预混液能节省实验时间,避免了常规PCR试剂多次加样造成的实验污染。预混液本身含有染料,扩增完成后可直接上样,进行电泳检测。
Fast Taq DNA聚合酶扩增速度为6kb/分钟。扩增1kb以下片段时,延伸时间设置为5秒∕kb;扩增1kb至5kb以下片段时,延伸时间设置为10秒∕kb;
扩增5kb以上片段时,延伸时间设置为15秒∕kb。如遇困难模板时,延伸时间设置为20秒∕kb。
产品用途:
常规PCR扩增,菌落PCR,TA克隆用的PCR片段扩增,RT-PCR。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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