找不到产品?留下需求帮您找
一键询价Corning® NK无血清培养试剂盒II
现货
面议
血管紧张素转换酶测定试剂盒(速率法)
现货
面议
ZeptoMetrix血清转化盘 Seroconversion Panels/血清学性能验证盘
一月
面议
OneStep Western WB加速液
现货
面议
β-淀粉酶,9000-91-3
现货
1¥
C57小鼠血清
现货
1950¥
CAS:84272-85-5,5-O-甲基维斯阿米醇苷,5-O-Methylvisammioside
现货
1¥
酸枣仁皂苷D,194851-84-8,Jujuboside D
现货
1¥
刺五加皂苷B,114902-16-8,Ciwujianoside B
现货
1¥
(20R)-原人参二醇,7755-01-3,(20R)-Protopanaxdiol
远慕 | 现货
1¥
水样中汞离子(Hg2+)浓度测试盒 微量法/可见分光光度法
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 20mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂三:液体 1.5mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 5mL 蒸馏水,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心 10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的 NOX(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或200W,超声 3s,间隔 10 秒,重复 30 次),用于 NOX 活性测定。血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 600nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)试剂四于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育 5min。
(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、200μL 试剂四和 40μL 试剂五,混匀,记录 600nm处 20s 时吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。