产品规格
产品名称 | 最低检测灵敏度 | 编号 | 规格 |
高敏型化学发光检测试剂盒 (High Sensitive ECL Detection Kit) | 低皮克级 | ECL001 ECL002 | 2×50 mL 2×250 mL |
超敏型化学发光检测试剂盒 (Super sensitive ECL Detection Kit) | 飞克级 | ESL001 ESL002 | 2×50 mL 2×250 mL |
特超敏化学发光检测试剂盒 (Ultra sensitive ECL Detection Kit) | 低飞克级及以下 | EUL001 EUL002 EUL003 | 2×50 mL 2×100 mL 2×250 mL |
产品简介
本试剂盒是基于鲁米诺底物的化学发光试剂盒,用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体及其关联的抗原。主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。检测原理是,蛋白混合物经电泳后转移到印迹膜上,经辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体与膜上的蛋白直接或间接特异反应,然后发光检测工作液被辣根过氧化物酶(HRP)催化发光,发出特定波长荧光(400-450 nm),从而可以通过X光胶片压片曝光或化学发光成像设备直接扫描检测信号。
本试剂盒使用了新型高效增强剂,发光强度比传统ECL显色液显著提高,并有效降低了背景。本司提供三款不同检测灵敏度的ECL试剂盒,可适配不同丰度的目的蛋白检测,对于丰度比较高的目的蛋白的检测,例如内参蛋白等的检测,推荐使用性价比更高的高敏型试剂盒;对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用特超敏试剂盒。
保存条件
2-8℃保存,有效期12个月。Solution A需注意避光保存。
使用方法
1. 按常规Western blot操作进行,二抗孵育后,在进行最后一次洗涤时根据膜的大小(每10 cm2 膜混合0.5 mL Solution A和0.5 mL Solution B),按照Solution A: Solution B=1:1比例配制发光检测工作液。
注:工作液建议现配现用,配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。
2. 用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育2分钟。
注:增加孵育时间不会增加灵敏度,有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应,加入发光液过少同样不利反应进行,会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。
3. 用平头镊子夹持蛋白膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内,轻轻赶出气泡。
4. 压片检测:将膜固定在暗盒后,暗房内取出X光胶片放置暗盒中压片1分钟,立即显影定影,根据其曝光结果,缩短或延长下一张X光胶片的压片时间。
5. 化学发光成像仪检测:将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中,然后参考仪器的说明书进行信号检测。
温馨提示
1. Solution A和Solution B在吸取过程中必须要更换枪头,两种溶液相互污染后会导致逐渐失效,影响后续的使用效果;
2. 各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效;
3. ECL的荧光持续时间很长,但开始反应后的30分钟内荧光更强一些,随后荧光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片;
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
5. 本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内!
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