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产品简介
Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR是Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR的升级版,在满足了可在同一管中进行反转录和基因组去除两个反应的同时,既简化了反应过程、大幅缩短了反应时间,又提高了反转录产物的产量。本产品4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix中含反转录反应所需的全部试剂,反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA,同时去除基因组DNA污染。本产品适合具有复杂的RNA模板的反转录,也非常适合少量模板以及低拷贝基因的反转录。
本产品反转录产物兼容探针法与染料法qPCR,探针法与染料法qPCR Mix分别推荐翌圣Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184),进行高性能基因表达分析。本产品反转录产物不适用于后续基因克隆等长片段扩增,如果需要,推荐翌圣Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149、Cat#11150)进行高效反转录。
产品信息
货号 | 11151ES10/11151ES60 |
规格 | 10 T/100 T |
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 11151ES10 | 11151ES60 |
11151-A | 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 μL | 500 μL |
11151-B | gDNA Remover Mix | 10 μL | 100 μL |
11151-C | RNase-free Water | 1 mL | 2×1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
在冰上融化11151-A/B/C组分,将试剂各组分充分震荡混匀,并在RNase-free离心管中配置如下体系:
组分 | 体积 (μL) |
RNase-free Water | To 20 μL |
4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 μL |
gDNA Remover Mix | 1 μL |
Total RNA | 10 pg -5 μg* |
or mRNA | 10 pg-500 ng* |
表1 反应体系
*建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低,可增加投入量至最多5 μg Total RNA。
反应程序
温度 | 时间 |
37℃ | 5 min* |
85℃ | 30 s |
表2 反应程序
*该过程包含反转录及gDNA消化。
反转录产物可立即用于qPCR反应,也可-20°C短期保存,长期保存建议分装后于-80°C存放,避免反复冻融。
注意事项
1.所有操作均应在冰上进行,且操作过程应避免RNase污染。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3.本产品仅作科研用途!
Ver.CN20230530
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