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获取电话K562人慢性骨髓性白血病细胞系 百欧博伟生物
一、产品信息
平台编号：Bio-105947
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：K562
细胞名称：人慢性骨髓性白血病细胞系
细胞用途：仅供科研使用。
用途：(STR鉴定正确)
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞介绍
该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的。该细胞曾被认为来源于粒系，处于高度未分化阶段；Anderson等人作了细胞膜特性的研究后，认为该细胞是红白血病细胞系。该细胞是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标，故而被广泛应用于这方面的研究。K562的原始细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞，能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。该细胞表达CD7（25％）。
三、细胞特性
（1）来源：人
（2）形态：淋巴母细胞样；圆形
（3）含量：>1x10e6 个/mL
（4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
（5）规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
四、细胞的运输和保存
使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
五、细胞培养步骤
（一）培养基及培养冻存条件准备：
1、培养液：RPMI1640+10%FBS
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%FBS+10%DMSO，现用现配。液氮储存。
（二）细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml FBS后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1）弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2）加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3）按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4）将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
六、质量检测
1、STR 鉴定：正确
2、细菌检测：阴性
3、支原体检测：阴性
七、注意事项
1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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