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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子结直肠腺癌 NCM460

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澳睿赛生物技术(上海)有限公司

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结直肠腺癌 NCM460

价格：￥ 3000

品牌：澳睿赛生物

供货周期：现货

货号：ORC0841

规格：1×10^6cells

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人正常结肠上皮细胞 (NCM460)

一、细胞基本属性
细胞名称	人正常结肠上皮细胞 ( NCM460)
细胞别称	NCM460
商品货号	ORC0841
种属来源	人
组织来源	结肠
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
生物安全等级	1
细胞规格	1 × 106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
保藏机构	ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050 BCRJ; 0145 ECACC; 90020104
培养基	RPMI-1640＋ 10% FBS＋ 1% P/S
培养条件	95%空气+5%CO2 ，温度： 37℃
冻存条件	60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO
传代比例	1:2-1:6 ，每 2-3 天换液一次
安全性	所有肿瘤细胞和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，建议在二级生物安全台内操作，并做好个人防护。
用途	仅供科研使用

二、细胞培养操作

1)复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2m L 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜 (或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜) 。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90% ，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

b、加 1ml 消化液 ( 0.25%Trypsin-0.53m M EDTA) 于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1 -2m L 培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按 1： 2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中， 1000 rpm条件下离心4 min ，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS ，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5× 106~ 1 × 107/mL ，轻轻混匀，每支冻存管冻存 1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱， 24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1 . 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2 . 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3 . 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后， 75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4 h。

4 . 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞， 900 rpm- 1000 rpm 离心 3 min ，弃上清。加

5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min ，用新鲜的完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5 . 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6 . 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代。

9. 注意：1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

生化试剂结直肠腺癌 NCM460由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子结直肠腺癌 NCM460的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应结直肠腺癌 NCM460外，澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供： LX-2（人肝星形细胞）、 MCF 10A（人正常乳腺上皮细胞）、 A549/DDP（人肺腺癌耐顺铂株）

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