获取电话Bio-29419 可可毛色二孢菌 百欧博伟生物
可可毛色二孢菌是Lasiodiplodia属的微生物，原产地为中国。主要用途为研究；教学，具体用途为药用植物内生菌。
一、菌种简介
平台编号：Bio-29419
规格：培养物
拉丁属名：Lasiodiplodia Theobromae
中文名称：可可毛色二孢菌
拉丁属名：Lasiodiplodia
种名加词：theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.
收藏时间*：2007-11-21
来源历史：中国林业科学研究院林业研究所转
原产国：中国
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；教学
具体用途：药用植物内生菌
特征特性：在PDA平板培养基上（30℃、RH70%）菌落初为灰白色，后变为灰褐至褐黑色，培养基为黑色，日生长量为4.0cm；在全光条件下，15～20d产生黑色近球状子实体，子座表面附满菌丝。一个子座内有多个分生孢子器，近球形，180.0～318.9×157~436.0µm；孔口周緣细胞深褐色，未成熟分生孢子单细胞、无色，为成熟孢子壁比成熟的分生孢子壁更厚，平均1.4µm；成熟的分生孢子双细胞褐色至黑色，表面有黑白相间的纵条纹，平均22.1×12.9µm；长宽比（L/W）为1.7。
生物危害程度：四类
致病对象：无
分离基物：海桑茎
采集地区：海南
培养基信息：培养基编号: 14 培养基名称: PDA
培养温度：25-28
资源保护类型：培养物
保藏方法：定期移植法
共享方式：资源交换性共享
提供形式：斜面培养物
实物状态：有实物
用途：药用植物内生菌
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、形态特征
在PDA平板培养基上（30℃、RH70%）菌落初为灰白色，后变为灰褐至褐黑色，培养基为黑色，日生长量为4.0cm；在全光条件下，15～20d产生黑色近球状子实体，子座表面附满菌丝。一个子座内有多个分生孢子器，近球形，180.0～318.9×157~436.0µm；孔口周缘细胞深褐色，未成熟分生孢子单细胞、无色，为成熟孢子壁比成熟的分生孢子壁更厚，平均1.4µm；成熟的分生孢子双细胞褐色至黑色，表面有黑白相间的纵条纹，平均22.1×12.9µm；长宽比（L/W）为1.7～1.8，侧丝无色，顶端略微膨大，无隔；未成熟分生孢子无色，易于Macrophoma属的真菌相混淆。
三、主要价值
主要用途为研究；教学，具体用途为药用植物内生菌。
四、微生物培养方法
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。
五、保存方法
1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
3、悬液保存法：
①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法：适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
4、载体保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
5、常用的冷冻保存法：
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。
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