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其他参数
Perenyi's 脱钙液
Perenyi's demineralized solution
产品规格:500ml
保存条件:室温保存,有效期12个月。
简介:
在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋 切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后, 再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱 钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA 是 一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经 EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需 要数周至数月。
Perenyi's 脱钙液是一种相对较好的温和脱钙剂,固定后对细胞核和细胞浆细微结构着 色好,脱钙后无需碱性溶液中和及冲洗。但脱钙速度较慢,不能用化学方法确定脱钙终点。
本产品仅用于科研领域,不用于临床诊断。
自备材料:
PBS,蒸馏水,加热装置或微波炉。
使用说明:
1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2. 组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3. 组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。
4. 组织转移至 15-20 倍体积的 Perenyi's 脱钙液中,脱钙 3-10 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 1~4 周即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复 3-5min,中间间隔 3-5min。
5. 用蒸馏水冲洗数次。
6. 常规脱水、包埋。
注意事项:
1. 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2. 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3. 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4. 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7. 脱钙终点的测定 (物理法) :采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。
8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!