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一键询价梅里埃 10400奈瑟氏球菌嗜血菌鉴定盒API NH
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梅里埃 API氧化酶试剂
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钦诚生物 | 一周
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其他参数
bScript II First-strand cDNA Synthesis Mix
bScript II cDNA 第一链合成预混试剂
【规格和组分】
【保存】
-20℃保存两年,避免反复冻融。【产品简介】
本产品是专为两步法 RT-PCR 第一步实验设计的高灵敏度反转录反应预混体系,优 化的反应体系 2×Reaction Mix (with Primer) 中预混了 Random Primer 和 Oligo18 (dT) Primer,简化了加样操作步骤,避免了操作误差和污染的风险;本产品可以从极低量的总 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一链 cDNA,合成的 cDNA 产量高,对后续的 PCR 或 real time PCR 实验兼容性好,适合于各种耐热 DNA 聚合酶。
【操作流程】
1. 按照下表配制反应体系:
2. 轻轻混匀,短暂离心;42℃孵育 15-50 min;
注:复杂模板逆转录温度建议提高至50℃;反应时间可根据实验应用场景做适当调整,如合成的cDNA用作qPCR 模板,则反应条件为42℃孵育15 min。
3. 85℃加热 5 分钟失活 bScript II Enzyme Mix;
4. 反应结束后所得的 cDNA,置于冰上进行后续实验或冷冻保存。
【注意事项】
1. 实验过程中请注意避免 RNase 污染。
2. 除酶以外的各种试剂,使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果。
3. RNA 模板的完整性对 cDNA 合成效率起着决定性作用,因此请选择可靠的 RNA 提取/纯化方法。
4. 由于所有的 RNA 提取方法都不能完全去除基因组 DNA,所以应根据后续实验的需求,选择是否需要在反转录反应前去除残留基因组 DNA。
5. bScript II Enzyme Mix 合成的第一链 cDNA 产物可直接加入 PCR 反应混合物中进行扩增,但加入体积不应超过 PCR 反应总体系的 10%,否则影响目的片段的产量。
6. RNA 可置于-70℃以下长期保存,cDNA 合成产物可置于-20℃保存。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!