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获取电话Walker256 大鼠腹水癌细胞 百欧博伟生物
一、细胞简介
平台编号：Bio-53583
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：Walker256
细胞名称：大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC256
形态特性：淋巴母细胞样
生长特性：悬浮生长
特征特性：Walker256是一株大鼠腹水癌细胞系。该细胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤，是研究抗肿瘤药物体内模型的极好材料。
培养条件：RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法：1:3传代,2-3天传一代
传代情况：C180
冻存条件：基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检：测阴性
用途：鼠 国内
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、实验材料
1、50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2、100ml灭菌烧杯2个
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把
8、酒精灯1台
三、实验操作步骤
a、采用认可的方案处死啮齿动物。
b、立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。
c、用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。
d、用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。
e、剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。
f、漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。
四、细胞培养的优点
1、研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2、研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3、研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4、研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5、研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6、研究的费用相对较经济
产品仅用于科研可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
五、处理方法
收到细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题,请即时联系。并进行以下操作:
1、75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2、将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。
3、预热培养基(含10%胎牛血清,1%双抗)。
4、显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)。
5、若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。
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