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- 样本类型:PFPE 组织切片
- 有效期:有效期 6 个月
- 英文名称:TFF3
TFF3 Ready-To-Use IHC Kit
三叶肽因子 3 即用型免疫组化试剂盒
样本类型：PFPE 组织切片
产品规格: 50T （包含两个对照切片）
保存条件：见下表。有效期 6 个月。
产品组分及规格
背景
Trefoil peptides are protease resistant molecules secreted throughout the gut that play a role in mucosal healing. Trefoil peptides contain three intrachain disulfide bonds, forming the trefoil motif, or P-domain and clustered in human chromosome 21q22.3. Trefoil Factor 3 (TFF3) is one of three trefoil peptides secreted by epithelial cells that line mucus membranes in the large and small intestines and lower respiratory tract. TFF3 is mainly active as a disulfide-linked homodimer and may have a role in promoting cell migration in healing processes. It is involved in the maintenance and repair of the intestinal mucosa.
别名
Trefoil Factor 3; Trefoil factor3; hP1.B; Intestinal trefoil factor; ITF; mITF; OTTMUSP00000021729; Polypeptide P1.B; TFF3; TFI; TREFOIL; Trefoil factor (intestinal).
验证数据
（三叶肽因子 3 IHC 试剂盒）对石蜡 包埋的大鼠结肠组织切片进行免疫组化分析。
（三叶肽因子 3 IHC 试剂盒）对石蜡 包埋的小鼠小肠组织切片进行免疫组化分析。
石蜡包埋组织的免疫组织化学方案
1. 脱蜡水化
石蜡切片置于新鲜二甲苯中浸泡脱蜡 3 次，每次 15 min；依次置于不同浓度（100%、95%、90%、80%、70%）乙醇浸泡各 5 min，再置于蒸馏水洗涤 5 min，重复 3 次。
2. 抗原修复
沸水浴修复：将 100×抗原修复缓冲液（试剂 2）用蒸馏水稀释成 1×抗原修复缓冲液，放入修复盒中并提前加热至95-100℃（注意盖好以防液体蒸发），然后将切片放入修复盒中，在沸水浴环境中保持外沸状态 15 min，室温自然冷却；用 PBS 缓冲液（试剂 1，将干粉溶解在 2L 蒸馏水中）清洗 5 min，重复 3 次。
3. 阻断内源性过氧化物酶
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，用免疫组化笔在组织周围画圈，加入 2-4 滴内源性过氧化物酶阻断剂（试剂 3），室温下置于湿盒中孵育 15 min，用 PBS 洗涤 5 min，重复 3 次。
4. 血清封闭
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，加入 2-4 滴封闭工作液（试剂 4），置于湿盒内 37℃封闭 20 min，以减少非特异性染色。
5. 一抗孵育
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，加入 2-4 滴 Histone H3 鼠单抗工作液（试剂 5），置于湿盒中，4℃孵育过夜或37℃孵育 1-2 h。
6. 复温
4℃孵育过夜后，室温下复温 15 min（若在室温下孵育一抗，则直接进入下一步清洗）；用 PBS 洗涤 5 min，重复3 次。
7. 二抗孵育
用吸水纸吸玻片上多余的液体，加入 2-4 滴 HRP 标记羊抗鼠 IgG 工作液（试剂 6），置于湿盒中，37℃孵育 1-2 h；用 PBS 洗涤 5 min，重复 3 次。
8. 显色
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，在每张切片上滴加约 50 μL 新配制的 DAB 工作液（试剂 7:试剂 8:PBS=1:1:18），作用 3-5 min。显微镜下观察结果，达到合适的显色强度后，用蒸馏水冲洗切片以终止反应，用蒸馏水冲洗 5 min，重复 3 次。
9. 复染
滴加适量复染试剂（试剂 9）复染 3-5 min，蒸馏水冲洗 5 min，滴加盐酸酒精分化约 30 s，蒸馏水洗涤 5 min，重复 2 次。
10. 脱水封片
将玻片依次置于不同浓度（70%、80%、90%、95%、100%）乙醇，各 5 min；然后置于新鲜二甲苯中浸泡脱蜡3 次，每次 15 min。用吸水纸吸去多余的二甲苯，滴加适量封片剂（试剂 10）在组织上，将盖玻片盖在组织上，避免产生气泡。
注意事项
1. 建议检测时进行阴性及阳性对照，以提高实验的可靠性。
2. 本品中的配套试剂，请不要用其他生产商产品替换使用。
3. DAB 为致癌物质，请采取必要的防范措施。
4. PBS 洗涤液（试剂 1）配制后在 4℃可保存一周；抗原修复液（试剂 2）及显色剂（试剂 7 和 8）的工作液需每次实验时现用现配。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
