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- 样本类型:PFPE 组织切片
- 有效期:有效期 6 个月
- 英文名称:MBP
MBP Ready-To-Use IHC Kit
髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白即用型免疫组化试剂盒
样本类型：PFPE 组织切片
产品规格: 50T （包含三个对照切片）
保存条件：见下表。有效期 6 个月。
产品组分及规格
背景
The protein encoded by the classic MBP gene is a major constituent of the myelin sheath of oligodendrocytes and Schwann cells in the nervous system. However, MBP-related transcripts are also present in the bone marrow and the immune system. These mRNAs arise from the long MBP gene (otherwise called "Golli-MBP") that contains 3 additional exons located upstream of the classic MBP exons. Alternative splicing from the Golli and the MBP transcription start sites gives rise to 2 sets of MBP-related transcripts and gene products. The Golli mRNAs contain 3 exons unique to Golli-MBP, spliced in-frame to 1 or more MBP exons. They encode hybrid proteins that have N-terminal Golli aa sequence linked to MBP aa sequence. The second family of transcripts contain only MBP exons and produce the well characterized myelin basic proteins. This complex gene structure is conserved among species suggesting that the MBP transcription unit is an integral part of the Golli transcription unit and that this arrangement is important for the function and/or regulation of these genes.
别名
CAB27; CALB 1; CALB; CALB1; Calbindin 1 28kDa; Calbindin-D-28K; Calbindin D28; D 28K; D28K; Vitamin D dependent calcium binding protein; Vitamin D dependent calcium binding protein avian type; Vitamin D dependent calcium binding protein avian-type; Vitamin D-dependent calcium-binding protein; CALB1_HUMAN.
验证数据
（髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白 IHC 试剂 盒）对石蜡包埋的人脑组织切片进行免疫组化分析。
（髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白 IHC 试剂 盒）对石蜡包埋的小鼠脑组织切片进行免疫组化分析。
（髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白 IHC 试剂 盒）对石蜡包埋的大鼠脑组织切片进行免疫组化分析。
石蜡包埋组织的免疫组织化学方案
1. 脱蜡水化
石蜡切片置于新鲜二甲苯中浸泡脱蜡 3 次，每次 15 min；依次置于不同浓度（100%、95%、90%、80%、70%）乙醇浸泡各 5 min，再置于蒸馏水洗涤 5 min，重复 3 次。
2. 抗原修复
沸水浴修复：将 100×抗原修复缓冲液（试剂 2）用蒸馏水稀释成 1×抗原修复缓冲液，放入修复盒中并提前加热至95-100℃（注意盖好以防液体蒸发），然后将切片放入修复盒中，在沸水浴环境中保持外沸状态 15 min，室温自然冷却；用 PBS 缓冲液（试剂 1，将干粉溶解在 2L 蒸馏水中）清洗 5 min，重复 3 次。
3. 阻断内源性过氧化物酶
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，用免疫组化笔在组织周围画圈，加入 2-4 滴内源性过氧化物酶阻断剂（试剂 3），室温下置于湿盒中孵育 15 min，用 PBS 洗涤 5 min，重复 3 次。
4. 血清封闭
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，加入 2-4 滴封闭工作液（试剂 4），置于湿盒内 37℃封闭 20 min，以减少非特异性染色。
5. 一抗孵育
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，加入 2-4 滴 Histone H3 鼠单抗工作液（试剂 5），置于湿盒中，4℃孵育过夜或37℃孵育 1-2 h。
6. 复温
4℃孵育过夜后，室温下复温 15 min（若在室温下孵育一抗，则直接进入下一步清洗）；用 PBS 洗涤 5 min，重复3 次。
7. 二抗孵育
用吸水纸吸玻片上多余的液体，加入 2-4 滴 HRP 标记羊抗鼠 IgG 工作液（试剂 6），置于湿盒中，37℃孵育 1-2 h；用 PBS 洗涤 5 min，重复 3 次。
8. 显色
用吸水纸吸去玻片上多余的液体，在每张切片上滴加约 50 μL 新配制的 DAB 工作液（试剂 7:试剂 8:PBS=1:1:18），作用 3-5 min。显微镜下观察结果，达到合适的显色强度后，用蒸馏水冲洗切片以终止反应，用蒸馏水冲洗 5 min，重复 3 次。
9. 复染
滴加适量复染试剂（试剂 9）复染 3-5 min，蒸馏水冲洗 5 min，滴加盐酸酒精分化约 30 s，蒸馏水洗涤 5 min，重复 2 次。
10. 脱水封片
将玻片依次置于不同浓度（70%、80%、90%、95%、100%）乙醇，各 5 min；然后置于新鲜二甲苯中浸泡脱蜡3 次，每次 15 min。用吸水纸吸去多余的二甲苯，滴加适量封片剂（试剂 10）在组织上，将盖玻片盖在组织上，避免产生气泡。
注意事项
1. 建议检测时进行阴性及阳性对照，以提高实验的可靠性。
2. 本品中的配套试剂，请不要用其他生产商产品替换使用。
3. DAB 为致癌物质，请采取必要的防范措施。
4. PBS 洗涤液（试剂 1）配制后在 4℃可保存一周；抗原修复液（试剂 2）及显色剂（试剂 7 和 8）的工作液需每次实验时现用现配。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
