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上海博尔森生物科技有限公司

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牛赤羽病毒RT-PCR试剂盒

价格：￥ 3490

品牌：博尔森

供货周期： 7天

货号：BES206207P

型号：50次

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牛赤羽病毒RT-PCR试剂盒

【产品名称】

英文名称：Akabane Disease Virus(AKAV) RT-PCR Kit

中文名称：牛赤羽病毒RT-PCR试剂盒

【包装规格】

50T/盒

【预期用途】

牛赤羽病毒(Akabane Virus，AKAV) 会引起赤羽病，又称阿卡班病，是牛、羊的一种以流产、早产、死胎、胎儿畸形、木乃伊、新生胎儿发生关节弯曲积水性无脑综合症为特征的病毒性传染病。特征性的表现是妊娠牛异常分娩，多发生于怀孕 7 个月以上或接近妊娠期满的牛。感染初期胎龄越大的胎儿早产发生的越多，中期发生难产，即使顺产，新生犊也不能站立。后期多产出无生活能力的犊牛或瞎眼的犊牛。该病毒会给养殖业带来较大的经济损失，因此灵敏快捷的诊断产品具有重要的意义。为此本公司开发了本产品，可用于在科研领域快速定量检测牛赤羽病病毒。它具有下列特点：

1. 一站式，用于不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。

2. 根据牛赤羽病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。

【检验原理】

本试剂盒采用RT-PCR技术，针对牛赤羽病毒的基因高度保守区域设计特异性引物，用RT-PCR 技术对牛赤羽病毒的核酸进行体外扩增检测，在反应体系中含牛赤羽病毒核酸模板的情况下，RT-PCR反应进行特异性扩增，利用琼脂糖凝胶电泳技术对RT-PCR扩增产物进行检测，依据特异性扩增片段的结果，判断待检样品中是否含有牛赤羽病毒成分，实现检测结果的定性分析。

【试剂组成】

名称	规格
5×双酶一管式 RT-PCR Buffer	200μL×1管
MMLV-Taq Mix	75μL×1管
超纯水	1mL×1管
牛赤羽病毒RT-PCR引物混合液	100μL×1管
牛赤羽病毒RT-PCR阳性对照（1×10E8 拷贝/μL）	50μL×1管
核酸释放剂	20 次1mL×1管
使用手册	一份

注：为避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供专一的DNA 片段作为阳性对照。

【储存条件及有效期】

低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。

【自备试剂】

样品 RNA。

【样品RNA的制备】

1. 如果有 N 个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL牛赤羽病毒PCR阳性对照的10000倍稀释的（稀释后浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL 相当于1万拷贝，可以将10μL原液加入到990μL自备TE溶液中，充分混匀，此为100倍稀释液。再取10μL此稀释液加入到990μL自备TE溶液中，充分混匀，此为10000倍稀释液）再加上一定量的水作为制备的阳性对照（加水后其总体积跟样品一样，样品体积多少取决于所用试剂盒的要求）。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。

【设置 RT-PCR 反应（20μL 体系】

3. 如果有N+2个样品，则标记N+4个PCR管（额外增加的两个管一个是RT-PCR阳性对照，另一个是RT-PCR阴性对照）并按照下表在PCR管中加入下列成分：

成份	N+2 个样品管	RT-PCR阴性对照	RT-PCR阳性对照
5×双酶一管式RT-PCR Buffer	各4μL	4μL	4μL
牛赤羽病毒RT-PCR引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2个制备的RNA样品	各12.5μL	不加	不加
超纯水	不加	12.5μL	不加
牛赤羽病毒RT-PCR阳性对照的10000倍稀释液	不加	不加	12.5μL
MMLV-Taq Mix	1.5μL	1.5μL	1.5μL