Tb 1 Lu(蝙蝠肺细胞)百欧博伟生物
蝙蝠肺细胞分离自蝙蝠肺组织形态为贴壁生长。肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。
一、细胞简介
平台编号:Bio-73449
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:Tb 1 Lu
细胞名称:Tb 1 Lu(蝙蝠肺细胞)
种属:蝙蝠
年龄(性别):成年
组织来源:肺
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
生长培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
二、细胞特性
肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。
三、细胞复苏
1、将冷冻管迅速由液氮转入到37℃水浴中,冷冻管的顶部保持在水面以上以避免任何污染,不定时搅拌加速解冻;
2、当细胞完全解冻后,用含70%乙醇的纱布擦拭冷冻管消毒;
3、将解冻后细胞转移到含4℃预平衡培养液的试管中;
4、细胞悬液在4℃下200磄离心10分钟;
5、弃上清,将细胞重新悬浮在新鲜培养液中;
6、将细胞转移到细胞培养瓶,CO2孵箱中培养;
7、是用倒置显微镜检查细胞存活率以及细胞密度,如果细胞密度过高,用培养液稀释至适宜浓度。
四、细胞的运输和保存
1)对于常温运输的细胞,收到细胞后,检查是否有运输问题,即细胞培养瓶或管是否破损,细胞培养液是否溢出。若没有运输问题,请75%酒精消毒后,保留封口膜,放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数:温度,湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后,细胞状态稳定后,即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系,A2780(人卵巢癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许,培养的前三天内做细胞拍照记录,通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。
2)对于干冰运输的细胞,请取出冷冻管后,须立即放入37C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。然后将其复苏培养,次日更换培养液。
五、细胞的处理方法和注意事项
1)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
2)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
3)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
六、下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染
一)杆菌污染:培养基中加入抗生素可以减少此种污染,但也不是绝对的。
二)支原体污染:传说中的黑焦虫,长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。
三)念珠菌污染:似乎无处不在,而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上,高倍镜下呈树枝状或葡萄状。
四)霉菌污染、比较常见的一种污染,常常来源于污染的空气、水和器械。
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