获取电话小鼠肾小球系膜细胞永生化 百欧博伟生物
肾小球系膜细胞（MCs）是肾小球最主要的细胞之一，具有分泌细胞外基质、产生细胞因子、支撑肾小球毛细血管丛、吞噬和清除大分子物质等功能，在保持肾小球微血管床结构的完整性和系膜机制的稳态性上起到重要的作用，与肾小球相关疾病的发生与发展密切相关。因此，深入研究肾小球系膜细胞对肾小球疾病的防治具有重要的意义。
一、细胞简介
平台编号：Bio-105972
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：永生化细胞
细胞名称：小鼠肾小球系膜细胞永生化
用途：（免疫荧光鉴定）
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞详述
肾系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞，具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。同时还可产生和降解多种细胞外基质，参与系膜基质及肾小球基底膜的修复与更新，在肾小球生理功能和病理反应中起着重要作用。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
三、细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常肾组织。
2)细胞鉴定：结蛋白（Desmin）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
四、产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
五、产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
六、小鼠肾小球系膜细胞原代培养的一些实验技巧：
1、取材：肾小球系膜细胞位于肾皮质内肾小球毛细血管袢之间。因此，需要在无菌条件下，取出小鼠肾脏组织，置于含有双抗（青霉素、链霉素）且预冷的PBS液中，纵向切开肾脏组织，并分离、剪碎肾皮质层部分用于后续操作如图1所示；
2、消化：加入适量0.1 %（1 mg/ml）II型胶原酶，于37 ℃条件下振荡消化40 min；
3、过滤：消化结束后，使用含血清培养基终止消化，并将残留的大块组织于无菌条件下进行研磨，离心后分别使用70 μm与40 μm滤膜依次进行过滤；初步过滤后，使用大量无血清培养基反向冲洗40 μm滤膜，并收集冲洗液。在此，小编提醒各位，与多数原代细胞的操作步骤不同，肾小球系膜细胞的原代培养，留存的是反向冲洗的细胞，而不是初步过滤的细胞，请各位切记；
4、培养：反冲收集的细胞经PBS洗涤后，使用含10 % FBS的DMEM培养基进行常规条件培养；
5、鉴定：
a)形态观察：肾小球系膜细胞体积较大，呈星形、梭形，如图2所示；
b)免疫荧光：由于肾小球系膜细胞不具有特异性标志物，故可选择α-SMA（阳性）、VIII因子（阴性）Nephrin（阴性）等文献已报道确定的肾小球系膜细胞表达或不表达的蛋白进行鉴定。
最后，小编再次提醒各位，由于原代细胞比较脆弱，所以每一步都必须严格按照无菌操作规定进行，并且需要尽可能的小心与温柔对待分离的细胞。
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