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耗材通第 3 年

上海博尔森生物科技有限公司

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动物胞浆蛋白微量制备试剂盒

价格：￥ 290

品牌：博尔森

供货周期：一周

货号：BES232099ME

规格：30次

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动物胞浆蛋白微量制备试剂盒

产品及特点
DNA只存在于细胞核内,因此参与转录调节和 DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中，要研究蛋白质与 DNA的相互作用，首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐，一次处理大量样品时尤其不便，为此本公司开发了本产品，用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取，它具有下列特点:
1.提取制备过程简便，只需要一小时。

2.实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。

3.可用于培养的动物细胞，也可以用于组织细胞。

4.制备的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。

规格及成分

运输及保存 低温运输，4℃保存，有效期一年。

自备试剂 PBS缓冲液，PMSF溶液，DTT溶液
使用方法

1、对贴壁绷胞:将5×1057个细胞培养到覆盖率为55-65%，吸弃培养基，用自备的预冷PBS缓冲液洗涤细胞一次，将细胞从壁上小心刮下，转移到预冷的塑料离心管中，4℃ 300o rpm离心5分钟，小心弃上清。直接进入第三步进行后续处理。
2、对最浮细鹿:直接将5×1057个的悬浮细胞转移到1.5mL预冷的塑料离心管中，4℃ 3000 rpm离心5分钟，用自备的预冷的PBS洗涤细胞沉淀一次，3000 rpm离心5分钟，小心弃上清。直接进入第三步处理细胞沉淀。说明:悬浮细胞制备胞浆的效果一般好于贴壁细胞。
3、在细胞沉淀中加入相当于沉淀细胞体积5倍或更多的预冷的溶液A重悬细胞，一般不超过300 uL-500 uL溶液A。溶液A在临用前最好加入终浓度为0.2mM的PMSF和1mM 的 DTT。PMSF和DTT在水溶液中都不稳定，只能临用提加入。
4、冰浴静置10分钟。

5、将细胞转移到预冷的15mL的 Dounce或Potter玻璃匀浆器中(温和破裂细胞用)，上下匀浆10-15次（为检查效果，可取少量裂解物与自备的0.01%Trypan Blue溶液混合，在显微镜下观察，只有破裂细胞的细胞核才能染色，完整细胞无色。如果需要，可增加匀浆次数直到80-90%以上的细胞裂解为止)。
6、小心转移到预冷的离心管中，4℃ 17000g 离心15分钟，线粒体，细胞核等细胞器将沉淀到管底。保留上清（胞浆部分)待用。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

生化试剂动物胞浆蛋白微量制备试剂盒由上海博尔森生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子动物胞浆蛋白微量制备试剂盒的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应动物胞浆蛋白微量制备试剂盒外，上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供：二安替比林甲烷、焦硫酸钾、偶氮甲碱H

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