获取电话人肺癌细胞(淋巴结转移) 百欧博伟生物
一、细胞简介
平台编号：Bio-73108
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：NCI-H292
细胞名称：NCI-H292（人肺癌细胞(淋巴结转移)）
种属：人
年龄（性别）：女；32岁
组织来源：肺粘膜上皮细胞癌；肺
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
背景描述：NCI-H292细胞源自肺支气管黏液上皮样癌的淋巴结转移灶；先用成份限定的培养基分离得到，然后换成含血清的培养基培养。培养条件下，NCI-H292细胞保留了黏液上皮的特性，可从其超微结构的表现和多种鳞状上皮分化标记的表达而判断。NCI-H292细胞支持HBV的生长，左旋多巴脱羧酶阴性。NCI-H292细胞可以作为筛选模型，将人类亚基因组片段转染入细胞来研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌发生中的作用。NCI-H292细胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋红染色阳线，但神经丝三联蛋白阴性。
生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
用途：(STR鉴定正确)
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞的培养方法
收到人肺癌细胞说明书后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
a,弃去培养液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
c,加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
d,传代比例:1:2-1:3
三、细胞的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
四、培养基及培养冻存条件准备
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
五、注意事项
1、接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2、用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3、严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4、将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5、用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6、1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7、换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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