DNA粘转平试剂盒

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产品及特点
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3’到5’的聚合酶活性和5’到3’外切酶活性，将3’和/或5’突出的DNA片段转化成平末端，用于克隆工作。
1．简单，精心优化过的2 X Polishing Buffer中含有所需要的所有成分，不需要单独准备。

2．适用于任何平末端的DNA载体。

规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。

自备试剂 DNA片段
使用方法

1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq, Tth,T7,Klenow和Vent 等 DNA聚合酶合成的DNA片段，还是用限制性内切酶制备的DNA片段，粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份o沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法，离心柱DNA 吸附法和基因的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2．设置粘转平(Polishing)反应:
在一个干净的离心管中，分别加入10-500 ng 3’或5’突出的DNA片段25 uL 2 X Polishing Buffer 1 uL Pfu DNA polymerase补水到50 uL72℃保温2小时。
注意:如果不使用热盖式PCR仪器加热，则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。

3.反应后处理
粘转平反应后，样品可以放-20℃长期保存，也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10 uL的连接反应体系，一般需要加入1-2 uL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性，所以不必去除。但文献报道，去除后连接效率更高。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！