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获取电话土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前加入 10 mL 试剂六，沸水浴搅拌溶解后待用，用不完的试剂 2-8℃保存 1 个月；
2、 标准品：20μmol/mL 酪氨酸溶液。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、研钵、蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至680nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取10μL 20μmol/mL酪氨酸标准液，加入990μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.2μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要44μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 样本测定：
三、土壤酸性蛋白酶活性计算
单位定义：每天每g土样中产生1μmol的酪氨酸为一个土壤酸性蛋白酶活力单位。
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)=C标准×ΔA测定÷ΔA标准×V反总÷W÷T= 0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准：标准管浓度，0.2μmol/mL；V反总：反应体系总体积，0.25mL；T：反应时间，1d；W：样本质量，g。
注意事项：
当吸光值大于1.5时，建议将上清液用蒸馏水稀释后进行测定，计算时注意乘以稀释倍数。
实验实例：
1、 分别称取 2 份 0.05g 土样于 1.5mLEP 管中，分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作，用 96 孔板测定吸光值，计算 ΔA 测定= A 测定管-A 对照管=0.189-0.178=0.016，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤质量计算酶活得：
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.05×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W= 0.05×0.016÷0.329÷0.05= 0.0486 U/g 土样。
2、 分别称取 2 份 0.05g 森林土于 1.5mLEP 管中，分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作，用 96 孔板测定吸光值，计算 ΔA 测定= A 测定管-A 对照管=0.831-0.612=0.219，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤质量计算酶活得：
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.05×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W= 0.05×0.219÷0.329÷0.05= 0.6657 U/g 土样。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
