找不到产品？留下需求帮您找
一键询价-
彩色预染蛋白Marker（10-250kDa, 双色）
一周
598￥
-
琼脂糖 A2015
一周
280￥
-
Super ECL Plus（超敏化学发光检测试剂盒）
一周
566￥
-
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒（10%）
一周
375￥
-
Minerva Super Fusion Cloning Kit（无缝克隆试剂盒）
一周
875￥
-
Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞增殖检测试剂盒
一周
516￥
-
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
一周
1244￥
-
氨氮快速检测试纸
现货
278￥
-
COD氨氮总磷总氮测试包
现货
258￥
-
Hede8081TM包埋树脂试剂盒
海德生物 | 两周
1￥
获取电话漆酶活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1. 工作液的配制：一瓶试剂二用 25 mL 试剂一溶解。现用现配。
产品说明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，漆酶存在菇、菌及植物中，是一种环保型酶，其独特的催化性质在生物检测中有广泛的应用。漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者
增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、天平、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水，水浴锅
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
3、培养液：直接检测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 420nm，蒸馏水调零。
2、 水浴锅温度调至 45℃。
3、 操作表：在 1mL 玻璃比色皿中分别加入下列试剂：
三、漆酶活计算
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位。
漆酶酶活（U/mg prot）=ΔA÷（ε×d）×V 反总×109÷（V 样×Cpr）÷T=61.7×ΔA÷Cpr
2、按样本质量计算
酶活定义：每克样本每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位。
漆酶酶活（U/g 质量）=ΔA÷（ε×d）×V 反总×109÷（V 样×W÷V 样总）÷T=61.7×ΔA÷W
3、按细胞数量计算
酶活定义：每 104 个细胞每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位。
漆酶酶活（U/104 cell）=ΔA÷（ε×d）×V 反总×109÷（V 样×500÷V 样总）÷T=0.123×ΔA
4、按液体体积计算
酶活定义：每 mL 液体每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位。
漆酶酶活（U/mL）=ΔA÷（ε×d）×V 反总×109÷V 样÷T=61.7×ΔA
ε：ABTS 摩尔消光系数：36000L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，0.001L；V 样：反应中样本体积，0.15mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL，蛋白浓度需自行测定；W，样本质量，g；T：反应时间，3min；500：细胞总数，500 万；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
注意事项：
1、工作液需临用前配制，并且尽快使用，4℃保存一周，若变色则不能使用。
2、测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样本用提取液进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
3、空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，OD 值变化不超过 0.05。
实验实例：
1. 取 0.1g 香菇加 1mL 提取液进行样本处理，取上清后按照测定步骤操作，测得计算 ΔA 测定管=A2 测定-A1 测定=0.657-0.084=0.573，ΔA 空白管=A2 空白-A1 空白=0.087-0.058=0.029，ΔA=ΔA 测定管-ΔA 空白管=0.573-0.029=0.544，按样本质量计算酶活得：
漆酶酶活（U/g 质量）=61.7×ΔA÷W=61.7×0.544÷0.1=335.648 U/g 质量。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
