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获取电话产品概述
跨膜蛋白承担各种生物功能，膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。 酵母膜蛋白/胞质蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒，酵母膜蛋白/胞质蛋白提取试剂盒可以从各种酵母样本中提取膜蛋白/胞质蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。 本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
酵母
产品特点
1、 使用方便。
2、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项：
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 提取液B在使用前须一直置于2-8℃条件，否则下游膜蛋白提取时会导致不容易分层。
? 膜蛋白电泳时loading buffer应该避免煮沸。
? 膜蛋白电泳时可以提高loading buffer的SDS含量。
使用方法
1. 提取液制备：
每500ul酵母蛋白提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
每500ul膜蛋白溶解液C中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取适量酵母培养物，在4℃，2000×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用冷PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每100-200ul体积酵母沉淀物中加入500ul酵母蛋白提取液A，混匀后，在室温或37℃条件下轻轻振荡30分钟-1小时。
5. 在4℃，2000×g条件下离心5-10分钟，移除上清，收集沉淀。
6. 在沉淀物中加入500ul冷的（4℃）酵母蛋白提取液B，混匀。
7. 在2-8℃条件下轻轻振荡15-45分钟。
8. 将提取液在4℃条件下12000×g离心5分钟，取上清。
9. 将上清在37℃水浴10分钟。
10. 在37℃ 1000×g离心3分钟。
11. 此时溶液分为2层，上层部分为酵母细胞质蛋白，下层为膜蛋白。
12. 小心移除上层胞质蛋白部分，留下管底部下层部分大约30-50ul液体。
13. 用50-100ul膜蛋白溶解液C溶解该下层溶液，即得酵母膜蛋白样品。
14. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
