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支原体膜蛋白提取试剂盒是一种方便高效的高产膜蛋白提取试剂盒。支原体膜蛋白提取试剂盒可以从各种支原体中提取总膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀、质谱等各种下游蛋白研究。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
支原体
产品特点
1.使用方便，将蛋白提取的时间缩短至1小时。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5.本品不含EDTA，可以用于金属螯合层析等下游应用。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项：
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
使用方法
1. 提取液准备：
每500ul提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2. 收集好的支原体样本用PBS洗涤后，加入300-500ul冷的提取液A，充分混匀。
3. 置2-8℃条件下振荡30分钟-2小时。至支原体裂解完全，沉淀体积明显减少。
4. 将提取液在2-8℃低温下12000×g离心5分钟，取上清。
5. 在上清中加入3-5ul提取液B，充分混匀。
6. 在37℃水浴10分钟。
7. 在37℃， 1000×g离心3分钟。
8. 此时液体分为2层，小心移除上层溶液，留管底部下层大约30-50ul液体。
9. 用1-2倍体积的膜蛋白溶解液C溶解该溶液，即得支原体膜蛋白样品。
10. 该样品可以用BCA方法进行定量，调整相应的浓度用于下游实验。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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