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血小板蛋白提取试剂盒适用于从各种动物血小板中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
动物血小板
产品特点
1.使用方便，将蛋白提取的时间缩短至30分钟。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.Tyrode's solution/CGS缓冲液/生理盐水/ PBS等
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项：
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
? 以下血小板收集方法仅供参考。有条件时可以使用全自动血小板分离机分离血小板，可以使用凝胶过滤法收集，降低活化程度。也可使用实验室常用的方法或者根据文献选择方法。
? 血小板蛋白回收率大约70-80%。
使用方法
1. 取1-5 ml ACD抗凝血，室温200×g离心10分钟。
2. 收集上层血浆，弃下层血液细胞沉淀层。
3. 将上层血浆层室温200×g离心5分钟。
4. 上层血浆室温3000×g离心10分钟。
5. 弃上清，沉淀中加入500 μl 血小板洗涤液B洗涤一次，3000×g离心10分钟。
6. 弃上清，沉淀中加入200-500 μl冷的蛋白提取液A和2 μl蛋白酶抑制剂混合物，吹打混匀后，在4℃条件下振荡20分钟。
7. 在4℃，12000-16000×g条件下离心15分钟。
8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到血小板蛋白。
9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
