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细菌氧气消耗检测试剂盒（Oxygen Consumption Rate Assay Kit）是利用合成的特异性氧气荧光探针R11来检测细胞外耗氧情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行耗氧量测定。 耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能的关键性指示。通过这类指标来探究活细菌细胞代谢，可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。 R11分析提供了一种基于酶标仪的简单、灵敏的方法，用以测定原核细胞生长或筛选抗菌化合物，无需进行多次样品稀释或基于琼脂的冗长的研究。其还为微生物代谢研究提供了一种有价值的方法。酶标仪形式提供了筛选所需的通量和分辨率，且便于生成IC50 或 MIC 数据。 R11耗氧量分析可以实时测量细菌全细胞的耗氧量，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细菌细胞呼吸以及评估治疗对细菌功能毒性作用的一种可靠方法。 它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着细菌代谢作用的进行，溶解氧被消耗，样品中的氧气浓度降低，导致R11 分析的信号增加，从而实现对耗氧量的测定。 R11是氧气敏感的荧光探针，最da激发波长为 453 nm，最da发射波长为 592 nm。其荧光通过分子碰撞与氧气反应，由O2淬灭，在无氧条件下荧光强度更高，反之有氧条件下荧光强度变低，因此荧光信号的量与样品中细胞外O2的量成反比，从而R11可被用于监测细胞外氧气消耗的变化。在测定中，耗氧率由荧光信号随时间的变化计算。细胞耗氧量增加，荧光信号的变化率增加；反之，耗氧量减少，荧光信号的变化率降低。 R11与O2的这种反应是非破坏性且完全可逆的，R11没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细菌ROS、细胞ATP 、LDH或其它指标等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。 用R11进行细胞外耗氧检测方法及其简单，不需要适用特殊的仪器设备，只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。 R11采用可见光激发检测，相对于采用紫外光激发的检测试剂，细胞损伤更低，对细胞的毒害更小。结果更加准确客观。 细菌细胞氧气消耗检测试剂盒可以用于直接，实时分析细胞耗氧代谢功能。本试剂盒可以用来测量各种全细胞，透化细胞，各种3D培养物，支架和基质等。R11还适用于分离的酶，酵母和霉菌等的细胞外耗氧情况测量。 以96孔细胞培养板计，本试剂盒小包装可以检测200-400个样本。 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.探针-20℃密封避光保存；
2.避免反复冻融。
3.注意防止氧化；
4.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪
适用样本
细菌
产品特点
1.广泛适用于各种体外模型；不再局限于单层细胞，还能测定悬浮细胞、微生物和特定的 3D 培养物；
2.简单的“混合-检测”方案允许使用多种其他分析试剂盒进行多参数分析；
3.可逆转，能够观察耗氧量的瞬态和长时间变化；
4.可适配多数荧光酶标仪以及标准 96 孔和 384 孔；
5.以高通量的形式方便地测量；
6.无需等待专用设备空闲所需的实验室时间，也无需大额资金专用设备投入。
产品应用
线粒体功能和细胞代谢研究
仪器准备
1.荧光酶标仪
须配备相应的波长过滤器和温度控制器。
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.黑色透明底荧光专用96孔培养板
2.离心管
3.吸头
4.一次性手套
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.以下操作以96孔细胞培养板为例。其他培养容器或装置请根据实际情况调整试剂用量和检测方法。各试剂等比例调整即可。O2荧光探针终浓度16倍稀释最jia。
4.R11探针的信号变化直接取决于所测量细胞类型的细胞呼吸速率，建议尽可能使用每孔高的细胞密度作为起点，并根据需要减少细胞数量。
5.并非所有细胞类型都消耗足够用于检测的氧气。
6.最hao使用荧光培养专用的透明底黑色培养板。实在没有的话可以采用透明板，注意细胞孔间隔开，减少检测时各孔之间的光互相干扰。
7.用于测定的所有仪器试剂溶液耗材均需37℃预热。
8.添加氧气封闭液时注意避免产生气泡。
9.尽可能使用多通道移液器添加试剂。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
