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总巯基检测试剂盒是利用经典的Ellman法进行总巯基检测的试剂盒。试剂盒准确性高，重复性和抗干扰性强，使用方便，可用于测各种液体、可溶性固体样本等。 Ellman试剂是一种通用的水溶性化合物，用于定量溶液中的游离巯基。该化合物的溶液在与巯基反应时会产生可测量的黄色产物。因此，Ellman试剂非常适合用作巯基测定试剂，因为它在反应缓冲液中对-SH基团具有特异性，摩尔消光系数高且反应时间短。 本试剂盒用于不含蛋白质样品的游离巯基检测。需要检测含蛋白质样品的游离巯基、总巯基等检测，请选择其它货号的试剂盒。如果需要还原所有二硫键，测定总半胱氨酸巯基，可以选择其它货号的试剂盒。 生物体内活性巯基（SH）主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。谷胱甘肽巯基能够修复氧化损伤的蛋白质，参与活性氧清除。蛋白质巯基主要存在于半胱氨酸，是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团，在蛋白质结构中2个巯基脱氢而形成的双硫键，使相邻多肽得以连接．对于维持蛋白质完整结构作用十分重要。 巯基还是很多酶的活性基团，一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合，影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动，药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。 所有动物组织都含有不同量的活性巯基，测定组织和血液中巯基含量已日益为人们所重视,以期探索对某些疾病的发生机理、治疗、预防以及预后判断等方面的研究意义。 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的 M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 可以提供各种细胞、组织染色，免疫组织化学，细胞培养等相关试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
任意，液体，或能溶于液体
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.生理盐水
2.纯水
耗材准备
1.比色皿
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
使用注意事项
1.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
2.待测样品中不能含有DTT或β-巯基乙醇 （BME，2-ME）等。
3.如果需要还原待测样品的二硫键，测定所有的二硫键巯基，可以使用DTT或β-巯基乙醇 （BME，2-ME）还原剂处理待测样品，但是注意一定要完全去除还原剂DTT和β-巯基乙醇，因为它们会引入巯基。可以采用透析或脱盐的方法去除还原剂DTT和β-巯基乙醇。
注意避免还原分子的样品损失，尽可能完全回收还原样品。
在还原过程中，向样品缓冲液中加入 5-20 mM EDTA 有助于防止二价金属（如 Zn2+、Cu2+ 和 Mg2+）对巯基进行再氧化。
还原样品应在还原后立即进行测定，因为二硫化物会随时间重新形成。
使用方法
1. 试剂配制：
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液（ELLMAN试剂），4℃避光保存。
2. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管（无ELLMAN试剂），空白管做一个即可，对照管每个样品均做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412 nm，0.5 cm光径，测定各管OD值。
3. 计算
液体样本中巯基含量（mmol/L）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×10
固体中巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×10÷固体含量（mg/ml）
【注】：
14.15为毫摩尔消光系数14.15 / mM •cm；14.15 mM-1•cm-1
0.5为光径0.5 cm；
10为反应总体积/样品取样量
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
