找不到产品?留下需求帮您找
一键询价产品概述
巯基检测试剂盒是利用经典的Ellman法进行总巯基检测的试剂盒。试剂盒准确性高,重复性和抗干扰性强,使用方便,可用于测各种动物的血清/血浆、组织、细胞、培养液以及植物组织样本等。 Ellman试剂是一种通用的水溶性化合物,用于定量溶液中的游离巯基。该化合物的溶液在与巯基反应时会产生可测量的黄色产物。因此,Ellman试剂非常适合用作巯基测定试剂,因为它在反应缓冲液中对-SH基团具有特异性,摩尔消光系数高且反应时间短。 本试剂盒用于各种样品中的游离巯基,如果需要还原所有二硫键,测定总半胱氨酸巯基,可以选择其它货号的试剂盒。 生物体内活性巯基(SH)主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。谷胱甘肽巯基能够修复氧化损伤的蛋白质,参与活性氧清除。蛋白质巯基主要存在于半胱氨酸,是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团,在蛋白质结构中两个巯基脱氢而形成的二硫键,使相邻多肽得以连接.对于维持蛋白质完整结构作用十分重要。 巯基还是很多酶的活性基团,一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合,影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动,药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。 所有动物组织都含有不同量的活性巯基,测定组织和血液中巯基含量已日益为人们所重视,以期探索对某些疾病的发生机理、治疗、预防以及预后判断等方面的研究意义。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
微孔板,酶标仪
适用样本
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、细胞裂解液、组织裂解液
产品应用
微孔板,酶标仪
仪器准备
1.酶标仪
2.混匀器
3.匀浆器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
使用注意事项
1.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部,防止开盖时洒落导致损失。
2.待测样品中不能含有DTT或β-巯基乙醇 (BME,2-ME)等。
3.测定复杂蛋白质样品时,如果需要将内部巯基完全暴露,可以用盐酸胍变性剂处理需要测定的蛋白质样品,有助于将内部巯基完全暴露。不推荐将尿素用作变性剂,因为它会形成与巯基发生反应的氰酸盐。
4.如果需要还原待测蛋白质样品的二硫键,测定所有的二硫键巯基,可以使用DTT或β-巯基乙醇 (BME,2-ME)还原剂处理待测蛋白样品,但是注意一定要完全去除还原剂DTT和β-巯基乙醇,因为它们会引入巯基。可以采用透析或脱盐的方法去除还原剂DTT和β-巯基乙醇。
注意避免还原分子的样品损失,尽可能完全回收还原蛋白质/肽。
在还原过程中,向样品缓冲液中加入 5-20 mM EDTA 有助于防止二价金属(如 Zn2+、Cu2+ 和 Mg2+)对巯基进行再氧化。
还原样品应在还原后立即进行测定,因为二硫化物会随时间重新形成。
5.血清/培养液等液体样本直接检测或稀释后检测。
6.动物、植物组织:按照组织质量(g):生理盐水或PBS体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1 g 组织,加入1 mL 生理盐水或PBS等缓冲液)进行冰浴匀浆,然后8000×g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
使用方法
1. 试剂配制:
使用前,准确吸取10 ml试剂B1加入试剂B2干粉,充分溶解混匀,即成试剂B工作液(ELLMAN试剂),4℃避光保存。
2. 样本处理
血清/培养液等液体样本:直接检测或稀释后检测。
蛋白质粉末:用水溶解后检测。
动物、植物细胞组织:按照组织质量(g):生理盐水或PBS体积(mL)为1:5-10 的比例(建议称取约100 mg 组织,加入1 mL 生理盐水或PBS等缓冲液)进行冰浴匀浆,然后8000×g,4℃离心15 min,取上清,置冰上待测。
3. 总巯基的测定
按下表在96孔板中加入试剂,同时做空白孔(无样品液)、样品对照孔(无ELLMAN试剂),空白孔做一个即可,对照孔每个样品均做。
充分混匀,置室温静置15分钟。412 nm,以反应缓冲液试剂A调零。
测定各管OD值:A测定、A空白、A对照。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!