获取电话MRC-5（人胚肺细胞）百欧博伟生物
MRC-5细胞来自14周龄男性胎儿的正常肺组织；MRC-5细胞老化前能传代42-46次群体倍增。MRC-5细胞是正常二倍体细胞系，46条染色体、XY核型。模式染色体数为46，概率为70%。
一、细胞简介
平台编号：bio-73102
规格：5×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名：MRC-5
细胞名称：MRC-5（人胚肺细胞）
种属：人
年龄（性别）：男；14周龄
组织来源：肺
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
生长培养基：MEM(货号:PM150410)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
二、收到常温细胞后的处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与中国微生物菌种查询网的技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用 75 酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养 2-4 小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过 80 ，可正常传代；若未超过 80 ，移除细胞培养瓶内培养基，预留 5ml 左右继续培养，直至细胞密度达 80 左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管内，1200rpm 离心 5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入 5ml 培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过 80 ，可将细胞悬液分至 2 个细胞培养瓶内培养，补加培养基至 5ml；若细胞密度未超过 80 ，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达 80 左右时再进行传代操作。
三、MRC-5（人胚肺细胞）的复苏
1、把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2、把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3、把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4、标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5、3天换一次培养基。
四、 MRC-5（人胚肺细胞）的传代
1、培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2、把原有培养基吸掉。
3、加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4、细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5、用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6、把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7、倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8、根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
五、 MRC-5（人胚肺细胞）的冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
要注意的就是无菌操作！
