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Hipro DNA Assembly Cloning kit

Hipro DNA Assembly Cloning kit

价格: 798

品牌:泽叶生物

供货周期: 现货

货号:ZY-601A

规格:25rxn

Hipro DNA Assembly Cloning kit

产品概述

       Hipro DNA组装克隆试剂盒可以高效、准确的组装DNA片段,从而实现简单快速的无缝克隆。该产品可以在一管内,恒温条件下,有效的连接多个带有重叠序列的片段,广泛应用于基因的快速定向克隆,实验过程涉及的反应机理如下:
(1) 利用外切酶活性产生单链3‘ 突出端,促使互补的末端重叠序列(15-20 bp)退火;
(2) 互补末端一旦退火完成,聚合酶活性会沿3‘延伸填补退火片段的缺口;
(3) 缺口补平后,利用DNA连接酶的连接酶活性完成DNA切刻处的修复,形成完整的重组载体。
整个过程只需在50℃下反应5-15 min即可完成,一次反应可兼容1~5个片段的同源重组,内含高保真DNA聚合酶和高保真DNA连接酶可确保重组准确进行,连接产物可进行多种化学感受态大肠杆菌的转化,阳性率接近100%。


产品内容

组分ZY-601AZY-601B
Hipro DNA Assembly Mix125 μL250 μL
pDA-Zero vector,linearied(50 ng/μL)25 μL50 μL
500bp control insert(20 ng/μL)5 μL10 μL


 
产品优势

快速:5 ~15min即可完成连接反应。
兼容性强:可完成1~5片段的同源重组。
方便快捷:2×预混液包装,减少加样次数,使得克隆更为高效。


实验案例

1.单片段同源重组

        以线性化的pDA-Zero vector、与2× PfuMax HiFi PCR ProMix扩增所得0.5kb DNA片段作为同源重组的底物,用Hipro DNA Assembly Mix进行50℃,5min快速同源重组后,转化到DH5α感受态细胞,培养12-16 h后,平板菌落生长状况如图1所示,随机挑取30颗单克隆用载体通用引物进行菌落PCR,后进行琼脂糖凝胶检测,如图4所示,分析上述结果可得,Hipro DNA Assembly Mix具有优异的重组效率和阳性率。

2.多片段同源重组

 
       以线性化的pET-28a载体、与2× PfuMax HiFi PCR ProMix扩增所得0.5 kb 、1.0 kb、2.0 kb DNA片段作为同源重组的底物,用Hipro DNA Assembly Mix进行50℃,15min快速同源重组后,转化到DH5α感受态细胞,培养12-16 h后,平板菌落生长状况如图3所示,随机挑取28颗单克隆用载体通用引物进行菌落PCR,后进行琼脂糖凝胶检测,如图4所示,分析上述结果可得,Hipro DNA Assembly Mix具有优异的重组效率和阳性率。
 
应用范围

单片段同源重组,多片段同源重组,快速克隆

产品存储

-20℃保存

特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!






生化试剂 Hipro DNA Assembly Cloning kit由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于PCR试剂 Hipro DNA Assembly Cloning kit的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应Hipro DNA Assembly Cloning kit外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供: 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)、 Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 、 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
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