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SDS裂解液

SDS裂解液

价格: 226

品牌:泽叶生物

供货周期: 现货

货号:ZY-6100

规格:100ml

SDS裂解液

产品简介

1. 我们生产的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀,chromatinimmunoprecipitation)等。

2. SDS裂解液的主要成分为SDS,sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodium

orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

3. 用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

使用方法:

对于培养细胞样品:

1. 取适当量的 SDS 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF(货号 WB0114),使 PMSF 的最终

浓度为 1mM。

2. 对于贴壁细胞,去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪吹打

数下,使裂解液和细胞充分接触,轻轻的摇晃约 5-10 分钟,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,

取上清,即可进行后续操作。

裂解液用量说明: 用于不同规格标准培养板裂解液容量

板规格/表面积 试剂容量

100mm 500-1000μι

60mm 250-500μι

6-well plate 200-400μιper well

24-well plate 100-200μιper well

96-well plate 50-100μιper well

3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪

吹打把细胞吹散,用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞

沉淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,取上清,

即可进行后续操作。

对于组织样品:

1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成

几个较小的组织块放入组织匀浆器中。

2. 取适当量的 SDS 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。

3. 按组织净重(g):裂解液(ml)=1:10 的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充分可

以适当添加更多的裂解液 如果需要高浓度的蛋白样品 可以适当减少裂解液的用量) 。

4. 用匀浆器匀浆,直至充分裂解。

5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3- 5 分钟,取上清,即可进行后续作。

注:SDS 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因

组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清

用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶

状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,

通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

注意事项:

1. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行,建议将样品分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接

以液体状态置-80℃中保存,不要反复冻融。

2. 需自备 PMSF, 建议在临用前数分钟内加入 PMSF。

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特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!





生化试剂 SDS裂解液由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于生物分子 SDS裂解液的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应SDS裂解液外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供: 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)、 Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 、 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
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