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DNase I溶液,10mg/mL
DNase I Solution
本产品是DNase I的10mg/mL的溶液,酶活性为1500-2500U/mg。DNase I从牛胰腺纯化得到是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶,分子量约32kDa(单体)。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5′端为磷酸基团,3′端为羟基。其活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
产品特点:
1.即开即用,不需要用户单独配置。
2.可用于制备RNase-free的DNase。本产品为粗制品,可能含残留的RNase,不能直接用于清除RNA样品中的DNA。
3.本产品可直接用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、制备TUNEL检测中的阳性对照。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
本产品可用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、TUNEL检测中剪切基因组DNA作为阳性对照。具体使用方法请参考相关资料。
注意:本产品浓度较高,如需对其进行稀释,需要自备DNase I储存液。
DNase I储存液的配方:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl?,50%(v/v)甘油。
附录:
1.DNase I活性定义:37℃10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
2.DNase I活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
3.纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶。
4.DNase I酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)甘油。
5.DNase I酶反应液(10×):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。
6.失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1%的SDS、DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!