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钦诚生物 | 一周
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羟基萘酚蓝溶液(HNB溶液),100X
HNB Solution, 100×
产品及特点 本产品为羟基萘酚蓝的12mM的溶液,可以按100uL体系加1uL本产品的 比例直接加入到LAMP或者RT- LAMP反应体系中,在最适镁离子浓度条件下 (一般为8mM-10mM)随反应进行其颜色发生改变,从而实时监测反应的进程。 具体使用量需要根据所用LAMP反应条件而调整。如果发生LAMP扩增,反应液 的颜色将由反应前的淡紫色变成淡蓝色。本产品具有如下特点:
1. 实时肉眼监测,不需要开盖,不需要电泳,非常方便。
2. 使用方便,按 1/100 的比例加入到反应体系即可。也可以先用水稀释成 20×母液,用时按 1/20 的比例加入。
3. 本规格足够 500 次 20uL 体系的 LAMP 或 UT-LAMP 扩增反应。
运输及保存 低温运输和-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 LAMP 试剂盒
使用方法 1. 将本产品放置在室温融化,然后震荡 10 秒钟,短暂离心后待用。
2. 将本染料按 LAMP 反应体系总体积的 1/100 加入到 LAMP 扩增反应液中。建议先用水稀释成 20×母液,用时按 1/20 的比例加入 20×母液。注意:本产品的显色跟反应体系中 Mg++的浓度和 dNTP 的浓度密切相关,加入本产品之前,LAMP 反应体系中的 dNTP 的终浓度最好为 3.2mM,Mg++的终浓度最好为 8mM,否则不会发生淡紫色到淡蓝色的颜色转变。下面是以的通用 LAMP 试剂盒设置的 20 uL 反应体系为例:
成份 样品管 阴性对照
LAMP Mix(2×) 10 uL 10 uL
自备 FIP 引物终浓度 0.8 uM 0.8 uM
自备 BIP 引物终浓度 0.8 uM 0.8 uM
自备 F3 引物终浓度 0.2 uM 0.2 uM
自备 B3 引物终浓度 0.2 uM 0.2 uM
自备 Loop F 引物终浓度(可选项) 0.4 uM 0.4 uM
自备 Loop B 引物终浓度(可选项) 0.4 uM 0.4 uM
自备模板 DNA 1-100ng 不加
Bst DNA 聚合酶(8U/uL) 1.5 uL 1.5 uL
LAMP 可见光染料 B 型 1uL 1uL
补水到 20 uL 20 uL
3. 63℃保温 1 小时。
4. 观察反应液颜色变化,如果发生 LAMP 扩增,颜色由反应前的淡紫色变成淡蓝色。没有发生 LAMP 扩增的样品则不会发生颜色变化。如果有必要,可以电泳确认。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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